[科普中国]-索森DNA吸印技术

索森DNA吸印杂交技术根据毛细管作用的原理，使在电泳凝胶中分离的DNA片段转移并结合在适当的滤膜上，然后通过同DNA或RNA探针的杂交作用，检测这些被吸印的DNA片段。这种方法由索森(E.Southern)于1975年首先提出并设计，故叫索森吸印杂交技术。

简介索森DNA吸印杂交技术根据毛细管作用的原理，使在电泳凝胶中分离的DNA片段转移并结合在适当的滤膜上，然后通过同DNA或RNA探针的杂交作用，检测这些被吸印的DNA片段。这种方法由索森(E.Southern)于1975年首先提出并设计，故叫索森吸印杂交技术。1

操作应用硝酸纤维素滤膜进行索森吸印实验，只要当该滤膜结合上两种互补链之一，便能够成功地发生核酸的杂交作用。琼脂糖凝胶电泳分离的DNA片段，经过碱变性作用之后，平铺在已用电泳缓冲液饱和了的两张滤膜上，在凝胶上部覆盖一张硝酸纤维素滤膜，其上加一叠干滤纸，最后再加载一重物。这样由于干滤纸的吸引作用，凝胶中的单链DNA便随着电泳缓冲液一道转移，而一旦同硝酸纤维素滤膜接触，就会牢固地缚结在它上面。这些DNA片段(单链)系严格按照它们在凝胶中的谱带模式原位吸印于滤膜上的，在80℃下烘烤2小时，DNA片段就会固定在硝酸纤维素滤膜上。然后，将此滤膜移放在加有放射性同位素标记探针的溶液中，进行核酸杂交。这些探针是同被吸印的单链核酸互补的RNA或DNA，一旦它们同硝酸纤维素滤膜上的单链互补DNA杂交后，就很难再解链。用漂洗法洗去没有杂交的游离探针分子，用X光底片所得的放射自显影图片，同溴化乙锭染色的凝胶谱带作对照，便可检出同探针的核苷酸序列同源的限制片段。1

应用萨瑟恩吸引杂交方法几乎可以同时构建出DNA分子的物理图和遗传图，在分子生物学及基因克隆实验中的应用极为普遍。1

本词条内容贡献者为:

胡芳碧 - 副教授 - 西南大学