[科普中国]-激素检测方法

激素测定就是对动物体液或者组织的激素含量进行测定，它能够有效地反映出激素的正常水平，从而确定人体是否达到健康的状态，激素测定方法可分为多种，包括生物、化学鉴定细胞、化学鉴定等等。随着现代化医学技术的提高，激素测定的方法也越来越完善，种类也越来越多样。1

简介激素检测方法通常用的方法有免疫测定法，放射免疫测定法，受体结合测定法和血浆蛋白结合测定法。世界卫生组织根据其测定原理对蛋白结合测定法提出新的分类标准和统一命名。这些分类标准包括：①在测定中是否需要标记物；②标记的是被测物还是结合蛋白；③在测定系统中被测物过量还是结合蛋白过量；④测定的是被测物本身（直接法）还是结合蛋白（间接法）；⑤在测定系统中是否需要分离步骤。1

主要类型免疫测定法

不用标记物的蛋白结合测定法——免疫测定法 基于被测物（抗原）与其特异结合蛋白（抗体）结合时所出现的沉淀线作为测定指标的，在测定系统中加入的抗体是过量的。操作较为迅速和方便。但这一测定法只适应于测定大分子物质，被测物的浓度较高，只有这样才形成能用肉眼看到的抗原-抗体复合物，这类方法应用较少。

放射免疫测定法

标记抗原的免疫测定法——放射免疫测定法 这是以标记抗原和未标记抗原与同一抗体的竞争性结合反应为基础的。随着未标记抗原增加，在反应系统中复合物中标记的抗原越来越少，因而在仪器上所测到的放射性记数也越来越少，由此可以作出一条标准曲线，并从标准曲线上查出被测样品的含量。放射免疫测定法既能测定蛋白质类的大分子物质，也能测定半抗原一类的小分子物质。放射免疫测定法的灵敏度高，样品用量少，并便于自动化操作。放射免疫测定法属结合蛋白（抗体）限量测定，标记的是被测物（抗原），所以它属于直接测定。

免疫放射计量测定法

标记抗体的免疫测定——免疫放射计量测定法 这是标记特异抗体。在反应系统中加入过量的标记抗体以便使全部被测抗原与之结合，然后，将结合和未结合的抗体分开。用吸附剂除去未结合的抗体，因此最后在仪器上测到的是结合型的抗体，这是一种间接测定，并且是一种过量蛋白结合试剂测定法。它与放射免疫测定法有本质上的区别。过量蛋白结合试剂测定法反应迅速，反应更为灵敏，但特异性较差。为了克服这一不足，有人发展了一种夹心面包免疫放射计量测定法，大大提高了特异性和灵敏度。

非同位素标记的免疫测定 除用同位素作标记物之外，还有许多化合物可用作标记物。如酶、荧光素、病毒、金属、红细胞、乳酸和其他许多特异显色颗粒。非同位素免疫测定的命名可按放射免疫命名的格式来表示。如：放射免疫测定、酶免疫测定、荧光免疫测定和病毒免疫测定等。

用非同位素标记抗体的免疫计量测定，也可仿照免疫放射计量测定法的命名来表示。如：免疫酶计量测定；免疫荧光计量测定。1

抗体选择血液中类固醇激素检测使用的抗体具有高度特异性，但大多数用于粪便中 类固醇激素检测的抗体具有群体特异性，有相 同结合部位的所有激素代谢物都可以被检测到。 虽然如此，在抗体选择时需尽量选择实 验物种的特异性抗体，如果没有，可以考虑近缘 物种的抗体。因为不同类群，甚至同一物种的 不同种群，类固醇激素的产物也可能不同，如在鸟类和小型哺乳动物中最主要的糖皮质激素是 皮质酮，而中大型哺乳动物及鱼类中，主要的糖 皮质激素是皮质醇。1

基本原理免疫测定法：利用不同的标志物与蛋白质的结合进行测定。基于被测物 与抗体结合时所出现的沉淀线，从而测定激素的含量到底有多少。操作较为迅速和方便。每一次听法的适用范围比较有限，通常只能测定大分子物质，能用肉眼看到的抗原-抗体复合物。

放射免疫测定法：通过对抗原的标记，来测定抗原抗体的结合物，形成同一抗体的竞争性的反应为基础的。这种方法不仅能够测蛋白质类的大分子物质，而且还能够测定小分子物质。放射免疫测定法的灵敏度高，属于直接测定。

免疫放射计量测定法：这一种标记抗体的特异性检测。在反应系统中加入过量的标记抗体以确保能够和反应物中的全部抗原结合。这是一种间接测定，反应迅速，反应更为灵敏。能够适应于各种人群的检测，其适应性也非常强。

本词条内容贡献者为:

赵阳国 - 副教授 - 中国海洋大学