周围神经系统中的神经胶质细胞称施万(schwann,又名雪旺细胞)细胞,它沿神经元的突起分布。施万细胞包裹在神经纤维上,这种神经纤维叫有髓神经纤维。有髓神经纤维和无髓神经纤维的施万细胞的形态和功能有所差异,施万细胞的外表面有基膜,能分泌神经营养因子,促进受损的神经元的存活及其轴突的再生,参与周围神经系统中神经纤维的构成。施万细胞的胞核呈长卵圆形,其长轴与轴突平行,核周有少量胞质。由于施万细胞包在轴突的外面,故又称神经膜细胞(neurilemmalcell),它的外面包有一层基膜。施万细胞最外面的一层胞膜与基膜一起往往又称神经膜(neurilemma),光镜下可见此膜。
髓鞘的形成:在有髓神经纤维发生中,伴随轴突一起生长的施万细胞表面凹陷成一纵沟,轴突位于纵沟内,沟缘的胞膜相贴形成轴突系膜(mesaxon)。轴突系膜不断伸长并反复包卷轴突,把胞质挤至细胞的内、外边缘及两端(即靠近郎氏结处),从而形成许多同心圆的螺旋膜板层,即为髓鞘。故髓鞘乃成自施万细胞的胞膜,属施万细胞的一部分。施万细胞的胞质除见于细胞的外、内边缘和两端外,还见于髓鞘板层内的施-兰切迹。该切迹构成螺旋形的胞质通道,并与细胞外、内边缘的胞质相通。
培养方法:(一)植块法:
植块法原理是成纤维细胞的增殖速度要比施万细胞快,通过反复的贴壁便可以获得较高纯度的施万细胞。此方法培养的周期较长,且培养过程中伴随着细胞活性及分裂能力的下降。
(二)酶消化法:
酶消化法的主要原理是用酶去除组织中的间质,使组织更为分散而使细胞呈单层排列。采用组织块反复种植纯化法、低浓度胰酶快速消化和差速贴壁法对施万细胞进行纯化,结果施万细胞活性较高,纯度可达90%以上,细胞所受到的外界因素影响也较少。
(三)三维培养法:
植块法、酶消化法主要是基于二维培养方法,然而体外细胞培养的一个重要原则是需模拟体内细胞生长环境,该模拟系统中最重要的核心因素是细胞与培养环境之间的相互作用。不同于传统的二维化单层细胞培养,三维细胞培养技术是将具有三维结构不同材料的载体与各种不同种类的细胞在体外共同培养,使细胞能够在载体的三维立体空间结构中迁移、生长,构成三维的细胞载体复合物。三维细胞培养是将细胞培植在一定的细胞外基质中,细胞外基质蛋白充当生长支架,使得细胞能够分化产生一定的三维组织特异性结构,所创建的细胞生长环境则最大程度地模拟体内环境。在施万细胞的培养中也有学者采用该方法进行培养,在培养液中放入三维支架,使细胞贴壁,形成Bungner带,支架的主要材料是胶原,其次还有聚酯纤维、聚乳酸等。有研究者采用三维自组装多肽水凝胶作为基质三维培养人胎儿施万细胞,结果培养出的施万细胞活性较高,细胞形态更加典型,且0.25%水凝胶效果最佳,能够形成良好的形成纳米纤维支架结构。
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李东芳 - 主任医师 - 山西医科大学第二附属医院 神经内科