[科普中国]-泪液乳酸脱氢酶

泪液中的LDH(EC1.1.1.27)和MDH(EC1.1.1.37)主要来自眼角膜上皮。它们在泪液中的浓度约为血清中该酶浓度的20倍。泪LDH主要含M亚基，以LDH5和LDH4含量最高。泪液MDH同工酶，用醋纤膜电泳，可分离出MDHs和MDHm，健康人泪液以MDHs为主。正常值

LDH： 1.29-9.02U/L LDH同工酶：LDH1 0.66±0.51% MDH活性： 0.25-2.2U/L MDH同工酶：MDHs 80%-98.1% 以MDHm>20%为异常 LDH/MDH：70岁者4.55±0.51

临床意义异常结果：在细菌性角膜溃疡和角结膜化学伤时，泪LDH和MDH活性下降。凡角结膜上皮损伤，LDH同工酶H/M比值和MDHm均有不同程度升高，但MDHm更能反映角膜组织损害的情况和病变程度。如在角膜溃疡和可疑干性角结膜炎(KCS)，MDHm升高而泪LDH的H/M比值却无显著变化。 泪LDH同工酶和LDH/MDH比值的测定有助于沙眼和慢性结膜炎的鉴别诊断。两者泪液LDH的H/M比值均明显下降，但沙眼时，泪液LDH/MDH比值无变化，而且LDH的M亚基升高更显著。 需要检查人群：角膜疾病的诊断。

注意事项不合宜人群：一般无特殊人群。 检查前禁忌：用手揉眼睛，这样会使眼睛感染，加重病情，影响检查效果。 检查时要求：配合医生指示做好相关检查。

检查过程（1）比色法： ① 乳酸钾、乳酸钠也可作为LDH底物，但因其为水溶液，含量不够准确，且保存不当易产生酮酸类物质，抑制酶促反应。而乳酸锂为固体，稳定，易于称量。 ② 除二乙醇胺缓冲液外，也可用Tris或焦磷酸缓冲液，避免了原金氏法中甘氨酸缓冲液对LDH的抑制作用，提高了阳性检出率。 ③ 比色应在5-15min内完成，否则吸光度降低。 ④ 结果>2500U时，可用生理盐水稀释标本后再测，其结果乘以稀释倍数。 （2）连续监测法： ① 标本勿溶血，当溶血达Hb 0.8g/L时，LDH活性可升高58%。 ② 标本于室温(25℃)保存，2天内酶活性稳定，冰箱保存酶活性降低，-20℃过夜LDH3、LDH4则全部失活。 ③ 用血清或肝素抗凝血浆测定结果满意，草酸盐可抑制LDH活性。 ④ 复溶后溶液变浊或初始吸光度>0.5应弃去。 ⑤ 利用正逆双向反应均可测定乳酸脱氢酶活性，但因反应温度、底物和缓冲液浓度不同，其参考区间也有差异。以乳酸和NAD为底物，在340nm监测吸光度增高速率为正向反应，以LD-L表示;以丙酮酸和NADH为底物，监测340nm吸光度下降速率为逆向反应，以LD-P表示。正逆反应两法相比，LD-L法的主要优点是：A.正向反应底物液的稳定性比逆向反应的稳定性大，前者冰箱可保存6个月以上，而后者仅几天；B.速率反应的线性范围(吸光度对监测时间t作图)较宽；C.重复性比LD-P好。由于逆向反应速度比正向反应速度快，其参考值约为LD-L的2倍。

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杨凡 - 副主任技师 - 上海同济大学附属同济医院 检验科