α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)与LDH关系十分密切,实际上它是LDH同工酶Ⅰ型,因其对α-酮丁酸亲合力高,所以当以α-酮丁酸作为底物时,所测LDH的活性特称为α-羟丁酸脱氢酶活性。α-HBDH测定方法主要有比色法和连续监测法。正常值
(1)比色法:61-155U/L(37℃)。 (2)连续监测法:72-182U/L。
临床意义α-HBDH的活性与LDH的活性变化一致,但更能反映LDH1的活性变化,其特异性比总LDH活性高。与LDH、AST、CK、CK-MB构成心肌酶谱,对诊断心肌梗死更有意义。 (1) 心肌梗死时α-HBDH活性明显升高,且维持时间较LDH长,LDH/α-HBDH比值(0.8-1.2)低于正常对照(1.2-1.6)。 (2) 鉴别肝病和心脏病。肝病和心脏病时LDH均可升高,但肝病时α-HBDH活性变化不大,LDH/α-HBDH比值可升高至1.6-2.5,而心脏疾病时α-HBDH则明显升高。 (3) 营养不良、叶酸和维生素B12缺乏时,α-HBDH活性亦可升高。
注意事项(1) 比色法: ① Rosalki及Wilkinson建立的α-HBDH测定方法是30℃的连续监测法,以国际单位(U/L)计算。上述方法是37℃比色法,为使各方法间结果有更好的可比性,可转换成30℃连续监测法的相应单位。37℃转换成30℃温度系数为0.87。 ② 因红细胞内该酶活性高,应在2h内及时分离血清,标本不能溶血。4℃酶活性稳定不少于7天。 ③ 可用EDTA(1mg/ml)、肝素(0.2mg/ml)抗凝血浆,草酸盐、枸橼酸钠、氟化物抗凝剂可抑制该酶活性。 (2) 连续监测法: ① 此法是1980年由英国临床化学协会(ACB)推荐,其最适底物浓度为15mmol/L(25℃),反应混合物的最终浓度:磷酸盐65.4mmol/L、NADH 0.2mmol/L、α-酮丁酸3.3mmol/L,样品容积组分比0.023。改为37℃测定结果与LDH相关性较好。 ② α-酮丁酸钠较稳定,α-酮丁酸长期存放,其缩合物可抑制酶促反应。 ③ 国内商品试剂盒的方法,一般是在操作前将α-酮丁酸与NADH溶液混合,置反应温度条件下数分钟后,作为单一试剂取出一定量加入样品中,延迟时间30s后,监测3min。
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顾春刚 - 副主任医师 - 天津市第三中心医院 病理科