[科普中国]-Ham试验

在酸性环境下孵育红细胞以诊断阵发性夜间血红蛋白尿的试验，但阳性反应亦可见于其它形式的贫血

原理阵发性睡眠性血红蛋白尿症(阵发性睡眠性血红蛋白尿)患者， 因其部分红细胞对补体敏感而易于溶解， 从而发生溶血现象。在实验室中， 可将红细胞置于酸化(pH 6.4～6.5)血清中的补体下， 正常人红细胞不溶解， 而阵发性睡眠性血红蛋白尿的部分患者中可见其红细胞溶解。若所用血清系患者本身的血清， 红细胞溶解更为显著。一般采用ABO型或与患者同型血清进行实验。但如将血清加热(56℃， 30分钟)后， 则其中补体破坏， 诱导溶血作用亦随之失活。

步骤试剂与仪器0.2 mol/L盐酸、 0.154 mol/L氯化钠溶液、 水浴箱、 离心机、 试管与玻璃珠。

操作方法(1)取患者血5 mL置入离心管内， 放入玻璃珠摇动以脱去纤维蛋白。加入3倍0.9%氯化钠溶液洗涤， 再离心5分钟弃去上清液。再重复洗涤2次， 最后1次离心10分钟， 弃去上清液后， 用0.9%氯化钠溶液配制成50%红细胞悬液。

(2)取正常同型或AB型血6 mL， 置于8 mL试管中， 待分离血清作为正常血清， 并取 1/3 置56℃ 水浴中30分钟作为正常灭活血清。

(3)编制1、 2、 3、 4号试管。

1号试管： 正常同型或AB型血清0.5 mL、 0.2 mol/L盐酸0.05 mL、 50%患者红细胞悬液0.05 mL。

2号试管： 正常同型或AB型血清0.5 mL、 50%患者红细胞悬液0.05 mL、

3号试管： 正常同型或AB型血清灭活0.5 mL、 0.2 mol/L盐酸0.05 mL、 50%患者红细胞悬液0.05 mL。

4号试管： 50%患者红细胞悬液0.05 mL、 0.9%氯化钠溶液0.5 mL。

(4)将各管混匀， 于37℃ 水浴中温育1小时后， 离心观察结果。

(5)一般第1管有明显溶血， 第2管有轻度溶血或不溶血， 而第3管、 第4管均无溶血， 表示Hams试验阳性。1

正常参考值阴性

临床意义酸化溶血试验(Hams试验)阳性主见于阵发性睡眠性血红蛋白尿综合征， 本试验假阳性与假阴性少见， 假阳性偶见于CDAⅡ型或HEMPAS中， 此时如改用患者酸化血清进行试验， 则结果转阴， 而阵发性睡眠性血红蛋白尿综合征者仍为阳性。

注意事项一、本试验对阵发性睡眠性血红蛋白尿的诊断是特异的，但试验的敏感性取决于补体敏感细胞的多少，故本试验敏感性不够，可能出现假阳性。

二、试验所用血清不够新鲜时，由于补体成分含量不足可能出现假阴性。

三、多次输血的患者，不正常细胞相对减少，可出现阴性。

本词条内容贡献者为:

慎慧 - 研究员 - 同济大学附属东方医院 检验科