[科普中国]-荧光检查法

荧光检查法是一种妇科生殖系统疾病检查诊断方法，比传统的肉眼观察法更客观，灵敏度更高，实用性更强。提高妇科检查结果的准确性，有利于及时诊断病症，起到早治疗早康复的效果，更能进行宫颈癌和一些瘤变病症的的早期筛查，保护妇女健康。

适应症在皮肤病中适用于细菌、真菌、病毒、衣原体、支原体等病原体感染的快速诊断，以及红斑狼疮、疱疹样皮炎、类天疱疮等病的诊断。

方法直接免疫荧光法

用以检查病人的皮肤组织中有无免疫球蛋白或补体沉积，用特异荧光抗体直接滴加于待检的标本上，由荧光标记的抗体与抗原发生特异结合。使之呈现荧光，根据荧光分布和形态确定抗原部位和性质。此法用已知的抗体检查未知的抗原，但一种标记抗体只能查一种抗原，可直接采用病人的病变组织。如：红斑狼疮、疱疹样皮炎、类天疱疮等作冰冻切片，荧光染色。此法简单、特异。
采集标本后，直接涂于载玻片上，自然干燥后，丙酮固定10分钟，待丙酮完全挥发后，加30 l特异性的荧光素标记的抗体，室温湿盒内孵育30min，使标记的抗体与抗原发生特异性结合，取出后 蒸溜水冲洗去未结合的抗体，置荧光显微镜下观察。

间接免疫荧光法

用以检测病人血清中是否存在某种特异抗体或自身抗体，反应中的两对抗原抗体相对应的特异结合，而第二抗体（荧光抗体）则针对第一抗体的结合体，由于第一抗原分子可与若干个抗体分子结合，因而第二结合反应后，灵敏度大大提高。本法常用于各种自身抗体的检测。如：系统性红斑狼疮、硬皮病等。
标本采后，保存于转送培养基中，临用前混匀后取悬液涂片，固定后加入50 l用PH 7.2 PBS 1:16稀释的特异性抗体，35℃孵育30分钟，取出后用PH 9.0的0.01 M的磷酸盐缓冲液浸泡10分钟，干燥后用50 l 1:500稀释的荧光抗体（第二抗体），35℃孵育30min，蒸溜水冲洗，干燥后甘油封固加盖玻片镜下观察。

补体结合法

本法是在间接法的基础上发展而成的，即在抗原抗体反应时，加入补体，再用荧光标记的抗补体抗体进行示踪。如：检测妊娠疱疹病人的自身抗体。1

使用器械医用荧光棒

医用荧光棒是一种化学发光的照明光源，把医用荧光棒贴在阴道扩张器叶片内侧，作为进行阴荧光视诊的照明光源，用于妇科常规检查、宫颈癌及癌前病变的筛查，本产品为一次性使用产品，不与人体接触，无毒、无放射性。

注意事项1．每次试验应该设阳性和阴性对照。
2． 应注意荧光抗体的质量。
3． 标本应及时检测，并避光保存。2

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张静 - 副教授 - 西南大学