[科普中国]-液体表面发酵法

菌种选育

工业发酵三个技术领域：菌种选育、发酵工艺（上游工程）和分离提取工艺（下游工程）。

菌种选育在发酵生产上的目的：提高发酵产量、改进菌种性能、产生新的发酵产物、去除多余的组分。

微生物突变的修复：光修复、切补修复、重组修复、SOS修复系统、DNA聚合酶的校正作用。

菌种选育的方法：自然选育、诱变育种、杂交育种、基因工程育种、原生质体育种。

自然选育（naturalscreening）：是指利用微生物在一定条件下产生自发突变的原理，通过分离、筛选排除衰退型菌株，从中选出维持或高于原有生产菌株的过程，以达到稳定或提高生产的目的。

菌种退化：菌种在长期的传代保存过程中，由于自发突变使菌种变得不纯，生产能力下降。原因有菌种遗传特性的改变、经诱变剂处理后的退化变异、菌种生理状况的改变（培养条件）。

自然选育的一般过程：单孢子悬浮液的制备、分离出单菌落、单菌落传斜面、摇瓶初筛、菌种保藏、摇瓶复筛、放大试验1。

诱变育种（mutationbreeding）是利用物理或化学诱变剂处理均匀分散的微生物细胞群体，促进其突变率大幅提高，然后采用简便、高效的筛选方法，从中选出少数具有优良性状的突变菌株。主要包括出发菌株的选择、诱变处理和筛选突变株三个部分。

诱变育种的步骤：出发菌株的选择、悬浮液的制备、诱变处理、中间培养、突变株的分离和筛选。

自发突变：微生物未经人为诱变剂处理或杂交等生物技术手段而自然发生的突变。

诱发突变：人为用化学、物理诱变剂处理微生物而引起的突变。

表型延迟：微生物表型的改变总是落后于基因型改变的现象。

理性化筛选（定向筛选）：运用遗传学、生物化学的原理，根据产物已知的或可能的生物合成途径、代谢调控机制和产物分子结构来进行设计和采用一些筛选方法，以打破微生物原有的代谢调控机制，获得能大量形成产物的高产突变株。

初级代谢产物高产菌株的筛选：筛选细胞膜透性改变的突变株、筛选营养缺陷型突变株、筛选结构类似物抗性突变株。

次级代谢产物（主要是抗生素）高产菌株的筛选：筛选营养缺陷型突变株、筛选负变株或零变株的回复突变株、筛选去磷酸盐调节突变株、筛选去碳源分解代谢调节突变株、筛选氨基酸结构类似物抗性突变株、筛选二价金属离子抗性突变株、筛选前体或前体结构。

培养基人工配制的、供微生物生长繁殖和生物合成各种代谢产物的多种营养物质的混合物。培养基成分包括：碳源（能源）、氮源、磷源、硫源、无机盐、水、生长因子、前提、促进剂、抑制剂等。

速效碳源、氮源和迟效碳源、氮源

生理酸性（碱性）物质：经过微生物代谢作用后，形成酸性（碱性）物质的营养成分。

前体：微生物代谢产物的合成过程中，能直接被微生物利用构成产物分子结构的一部分，而化合物本身的结构没有大变化的物质。

诱导物：一般指一些特殊的小分子物质，在微生物发酵过程中添加这些小分子物质后，能够诱导代谢产物的生物合成，提高发酵产量。

促进剂：是指那些细胞生长非必需的，但加入后却能显著提高发酵产量的一些物质，常以添加剂的形式加入发酵培养基中。

抑制剂：发酵过程中加入某些化学物质会抑制某些代谢途径的进行，同时会使另一代谢途径活跃，从而获得所需代谢产物，或使正常代谢产物的中间产物积累的物质。

发酵生产培养基：孢子培养基/斜面培养基，种子培养基，发酵培养基和补料培养基。

影响培养基质量的因素:原材料质量、水质、灭菌、培养基粘度。

培养基的筛选方法：单因子试验法、正交试验、均匀设计2。