[科普中国]-总挥发性盐基氮(TVBN)

产生原理

总挥发性盐基氮（TVB-N）指动物性食品由于酶和细菌的作用，在腐败过程中，使蛋白质分解而产生氨以及胺类等碱性含氮物质。此类物质具有挥发性，其含量越高，表明氨基酸被破坏的越多，特别是蛋氨酸和酪氨酸，因此营养价值大受影响1。

检测方法半微量定氮法原理

蛋白质在酶和细菌的作用下分解后产生碱性含氮物质，有氨、伯胺、仲胺等，此类物质具有挥发性，可在碱性溶液中被蒸馏出来，用标准酸滴定，计算含量。

试剂

①氧化镁混悬液 ②2%硼酸溶液（吸收液） ③0.2%甲基红乙醇液 ④0.1%亚甲蓝水溶液。

临用时将③④等量混合为混合指示液 ⑤0.0100N盐酸标准溶液或0.0100N 硫酸标准溶液。

仪器

①半微量定氮装置：Markhan氏式 ②微量滴定管：最小分度0.01ml。

操作方法

①样液的制备：将样品除去脂肪、骨头及筋腱后，切碎搅匀，称取10g于锥形瓶中，加100ml水，不时振摇，浸渍30min后过滤，滤液置于冰箱中备用。

②测定：预先将盛有10ml吸收液并加有5-6滴混合指示液的锥形瓶置于冷凝管下端，并使其下端插入锥形瓶内吸收的液面下，精密吸取5ml上述样品滤液于蒸馏器反应室内，加5ml 1%氧化镁混悬液，迅速盖塞，并加水以防漏气，通入蒸汽，待蒸汽充满蒸馏器内时即关闭蒸汽出口管，由冷并行管出现第一滴冷凝水开始计时，蒸馏5min即停止，吸收液用0.0100N盐酸标准溶液或0.0100N硫酸标准溶液滴定，终点呈蓝紫色。同时做试剂空白试验。

计算

（V1-V2）×N1×14

X1= ------------------------- ×100

m1×5/100

式中：X1——样品中挥发性盐基氮的含量，mg/100g

V1——测定用样液消耗盐酸或硫酸标准溶液体积，ml

V2——试剂空白消耗盐酸或硫酸标准溶液体积，ml

N1——盐酸或硫酸标准溶液的摩尔浓度，mol/L

m1——样品质量，g

14——1N盐酸或硫酸标准溶液1ml相当氮的毫克数2

微量扩散法原理

挥发性含氮物质在碱性溶液中释出，在扩散皿中于37℃时挥发后吸收于吸收液中，用标准酸滴定，计算含量。

试剂

①饱和碳酸钾溶液：称取50g碳酸钾，加50ml水，微加热助溶，使用时取上清液。

②水溶性胶：称取10g阿拉伯胶，加10ml水，再加5ml甘油及5g无水碳酸钾（或无水碳酸钠），研匀。

③吸收液：混合指示液、0.0100N盐酸或硫酸标准溶液，与半微量定氮法相同。

仪器

①扩散皿（标准型）：玻璃质，内外室总直径61mm，内室直径35mm；外室深度10mm，内室深度5mm；外室壁存3mm，内室壁存2.5mm，回壁纱厚玻璃盖，如图1-1所示，其他型号亦可用。

②微量滴定管：最小分度0.01ml。

操作方法

编辑

①将水溶性胶涂于扩散皿的边缘，在皿中央内室加入1ml吸收液及1滴混合指示液。在皿外室一侧加入1.00ml按半微量定氮法制备的样液，另一侧加入1ml饱和碳酸钾溶液，注意勿使两滴接触，立即盖好；密封后将皿于桌面上轻轻转动，使样液与碱液混合。

②将扩散皿置于37℃温箱内放置2h，揭去盖，用0.01N盐酸标准溶液或硫酸标准溶液滴定，终点呈蓝紫色。同时做试剂空白试验。

注意事项

编辑

①加碳酸钾时应小心加入，不可溅入内室。

②扩散皿应洁净、干燥，不带酸碱性。

③检样测定与空白试验均需各作2份平行试验。

④计算

（V3-V4）×N1×14

X2= ------------------------- ×100

m1×100/5

式中：X2——样品中挥发性盐基氮的含量，mg/100g

V3——测定用样液消耗盐酸或硫酸标准溶液体积，ml

V4——试剂空白消耗盐酸或硫酸标准溶液体积，ml

N1——盐酸或硫酸标准溶液的摩尔浓度，mol/L

m1——样品质量，g

14——1N盐酸或硫酸标准溶液1ml相当氮的毫克数2