变质消毒奶中的乳微杆菌的检测1、细菌的生化试验
(1)糖类发酵试验:将菌穿刺接于含有一种糖和指示剂的半固体培养基内,37℃温箱,培养48h;
(2)过氧化氢酶:将3%过氧化氢滴于菌落上;
(3)氧化酶试验:将培养菌涂于滤纸上,滴上1%二甲基对苯二胺溶液;
(4)硫化氢形成试验:用醋酸铅滤纸条法检测;
(5)细菌运动性::用半固体培养基法检验;
(6)柠檬酸盐利用试验:将菌接于西蒙氏柠檬酸盐斜面培养基上,经37℃培养变蓝色为阳性;
7)马尿酸钠试验:将菌接于马尿酸钠肉汤内,42℃培养48h,经离心,取上清0.8m,加入三氯化铁试剂0.2ml,立即混合均匀,15min后观察结果;
(8)明胶液化试验:将菌接于营养明胶内,22~25℃培养7天;1
(9)硝酸盐还原试验:将菌接于普通培养基内,37℃培养4天,加硝酸盐还原试剂甲液和乙液各一滴后观察结果。
2、细菌的耐热试验根据上述试验结果,在确定分离出的细菌为乳微杆菌的基础上,进行了下面的耐热试验。
第一组依据消毒奶加热处理应用的温度,而选用下列3个温度:
(1)将分离的乳微杆菌接入装有灭菌脱脂奶的小试管中,将其63℃加热30min。并迅速冷却至36℃左右,然后放入37℃温箱中,培养48h。
(2)将分离的细菌,吸入毛细管中,封口。分别在73℃加热15s,89℃加热1s,然后迅速冷却,将毛细管内的细菌分别接入灭菌脱脂乳中,放入37℃温箱中,培养48h,如细菌能耐过加热处理,而未杀死,会在乳中生长。
同时用大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌作为对照。
第二组,100℃时的耐热情况:
将变质奶和乳微杆菌菌液分别吸装入多支毛细管内,在沸水中加热1s、10s和1min,然后迅速在灭菌水中冷却,接入灭菌脱脂乳中,37℃温箱,培养48h。1
水体中好氧乳微杆菌的生理生化特性生理生化特性它的最适温度为 30 ℃,最佳初始 pH值是 8.5,装液量为 60 mL/150 mL, 促进生长的金属离子是 Mg2+ 、Mn 2+ 、Ca 2+ ,最佳碳源是葡萄糖 。在 10 ~ 25 ℃时生长量呈上升趋势,但变化不大 ;超过 35 ℃以后,菌体生长量明显表现出下降的趋势。2
有机解磷菌 好氧乳微杆菌菌株的初始pH耐受极限分别为 4.0 ~ 4.5和 10.5 ~ 11.0,其最适初始 pH范围为 8.0 ~ 9.0。在初始 pH为 5.5 ~10.0范围内时, pH值对好氧乳微杆菌菌株菌株生长影响不显著 。由此可知, SY2菌株对于环境的酸碱度具有较强的自适应能力和较广的 pH适应范围 。
形态特征好氧乳微杆菌菌株在有机磷固体培养基上培养, 菌落为半固体状 ,呈圆形,有同心圈 ,中间凸起,正面颜色为浅黄色,背面颜色为黄白色, 表面光滑,边缘平整,不透明 ,菌体大小为 2.6 ×10-6m。2
生理生化鉴定结果为该菌株是好氧革兰氏阳性菌,细胞形态为杆状,不运动。与其他从土壤中筛选的有机解磷菌相比 , 其解磷能力有很大的优势。