原子吸收法原理
试样经干法灰化或湿法消化后制成稀盐酸溶液,直接导入原子吸收分光光度计中用空气-乙炔火焰进行原子化,在248.3nm处测定,其吸光度与铁离子浓度正比,与标准比较测定铁含量。
试剂若无特别说明,所用试剂均为分析纯,所用水应符合GB/T 6682的要求。
(1)硝酸。
(2)高氯酸。
(3)盐酸。
(4)硝酸溶液:硝酸+水=1+1。
(5)混酸消化液:硝酸+高氯酸=7+1。
(6)盐酸溶液:盐酸+水=1+1。
(7)铁标准溶液(1000ug/mL):国家有证标准物质,或按下述方法配置:称取1.000g金属铁于烧杯中,加入50mL盐酸溶液使之溶解,转移至1000mL容量瓶中,用水稀释至刻度,混匀。
(8)铁标准中间液(100ug/mL):国家有证标准物质,或按下述方法配置:吸取铁标准溶液5.00mL,用水定容至50mL。
(9)铁标准使用液(10ug/mL):吸取铁标准溶液5.00mL,用水定容至50mL。
(10)硝酸溶液:硝酸+水=1+9。
仪器和设备所有玻璃仪器均以硝酸溶液浸泡2h以上,用去离子水冲洗后晾干或烘干,方可使用。
实验室常规设备及下列仪器。
(1)机械设备:用于式样的均质。包括绞肉机、斩拌机等肉类组织粉碎机。
(2)马弗炉:可控温于550℃±20℃。
(3)干燥箱。
(4)石英坩埚。
(5)分析天平:可准确称重至0.001g。
(6)电热板。
(7)原子吸收分光光度计。
分析步骤试样液制备
试样准备
按GB∕T 9695.19规定的方法取样。至少取有代表性的试样200g,使用适量的机械设备,将试样均质,均质后的试样尽快分析,否则应密闭低温贮存,防止试样或成分发生变化,贮存的试样在启用时应重新混匀。
试样消化
干灰化法
称取1-2g试样(精确至0.001g)放入石英坩埚中,置于130±10℃干燥箱中烘1h,使试样脱水。将坩埚在在可调电炉上缓慢加热,使试样炭化,开始是用小火加热,以防止试样溅出,待大烟冒过后提高温度,使试样完全炭化,直至补冒烟为止。炭化好的试样放入马弗炉中,于550±20℃下灰化2h。灰化好的试样应是灰白色,若灰分中有黑色碳粒,应取出坩埚,冷却至室温,加硝酸溶液湿润,然后在电热板上烘干后,在至于550±20℃马弗炉中灰化,直至灰分呈灰白色。
灰化好的试样用1.25mL硝酸溶液溶解,转移到25mL容量瓶中,用少量水冲洗石英坩埚多次,合并洗液,并用水稀释至刻度,摇匀。此溶液为试样液。
湿消化法
称取1-2g试样(精确至0.001g)放入100mL锥形瓶中,加入混酸消化液20mL,放入两粒玻璃珠,盖上小漏斗,静置过夜。样品在可调电炉上低温缓慢加热,以防产生大量泡沫和喷溅,消化至溶液颜色变浅,并有大量白烟时,将电炉关闭,用余温继续加热。当溶液出现淡黄、微绿接近无色时,从电炉上取下。若消化过程中溶液颜色变黑,应立即停止加热,冷却后补加适量混酸消化液,按原步骤操作直至消化完全。用10mL蒸馏水冲洗校漏斗及锥形瓶内壁,将锥形瓶置于150℃电热板上蒸发至锥形瓶中液体接近2-3mL,取下冷却至室温。将样品转移至容量瓶中,用少量水多次洗涤锥形瓶,洗液合并到容量瓶中,并用水稀释至刻度,摇匀,此溶液为试样液。
标准工作液制备
精密吸取铁标准使用液0.00mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL,分别置于25mL容量瓶中,加1.25mL硝酸溶液,用水稀释至刻度,混匀。此时容量瓶中溶液的铁浓度分别为0.00ug/mL、0.40ug/mL、0.80ug/mL、1.20ug/mL、1.60ug/mL、2.00ug/mL。
空白液制备
除不称取试样外,均按试样消化步骤进行操作。
测定
根据仪器型号,将仪器调至最佳条件,将标准工作液、试样液和空白液分别导入空气-乙炔火焰原子吸收分光光度计中,测其吸光度。测定参考条件:灯电流15mA,波长248.3nm,狭缝0.2nm,空气流量9.5L/min,乙炔流量3L/min,燃烧器高度7.5mm。
以标准工作液中铁的浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。根据试样液的吸光度,从标准曲线上查出溶液中对应的铁浓度值。
平行实验
按以上步骤,对同一试样进行平行试验测定。
结果计算按下式计算样品中铁的含量
X:试样中铁的含量,mg/kg;
c:从标准曲线上查得试样液中铁的浓度,ug/mL;
c0:从标准曲线上查的空白液中铁的浓度,ug/mL;
V:试样液定容体积,mL;
m:称取试样的质量,g。
结果取算术平均值,保留三位有效数字。
精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的10%。
分光光度法原理试样经干法灰化或湿法消化后制成稀酸溶液,以盐酸羟胺还原铁(Ⅲ)还原为铁(Ⅱ),铁(Ⅱ)与1, 10-菲啰啉在pH3~9范围内形成稳定的红色络合物。在510nm处测量吸光度,以标准曲线计算铁含量。
试剂若无特别说明,所用试剂均为分析纯,所用水应符合GB/T 6682的要求。
(1)乙醇。
(2)乙醇溶液(20%):量取20mL乙醇、80mL水混匀。
(3)1, 10-菲啰啉(2.5g/L):称取0.25g 1, 10-菲啰啉,用乙醇溶液溶解并稀释至100mL。
(4)盐酸羟胺(50g/L):称取5.0g盐酸羟胺,用水溶解并稀释至100mL,临用现配。
(5)酒石酸(100g/L):称取10g酒石酸,用水溶解并稀释至100mL。
(6)乙酸钠(500g/L):称取50g三水合乙酸钠,用水溶解并稀释至100mL。
仪器和设备所有玻璃仪器均以硝酸溶液浸泡2h以上,用去离子水冲洗后晾干或烘干,方可使用。
实验室常规设备及下列仪器。
分光光度计。
分析步骤试样液制备
试样准备
按GB∕T 9695.19规定的方法取样。至少取有代表性的试样200g,使用适量的机械设备,将试样均质,均质后的试样尽快分析,否则应密闭低温贮存,防止试样或成分发生变化,贮存的试样在启用时应重新混匀。
试样消化
干灰化法
称取1-2g试样(精确至0.001g)放入石英坩埚中,置于130±10℃干燥箱中烘1h,使试样脱水。将坩埚在在可调电炉上缓慢加热,使试样炭化,开始是用小火加热,以防止试样溅出,待大烟冒过后提高温度,使试样完全炭化,直至补冒烟为止。炭化好的试样放入马弗炉中,于550±20℃下灰化2h。灰化好的试样应是灰白色,若灰分中有黑色碳粒,应取出坩埚,冷却至室温,加硝酸溶液湿润,然后在电热板上烘干后,在至于550±20℃马弗炉中灰化,直至灰分呈灰白色。
灰化好的试样用1.25mL硝酸溶液溶解,转移到25mL容量瓶中,用少量水冲洗石英坩埚多次,合并洗液,并用水稀释至刻度,摇匀。此溶液为试样液。
湿消化法
称取1-2g试样(精确至0.001g)放入100mL锥形瓶中,加入混酸消化液20mL,放入两粒玻璃珠,盖上小漏斗,静置过夜。样品在可调电炉上低温缓慢加热,以防产生大量泡沫和喷溅,消化至溶液颜色变浅,并有大量白烟时,将电炉关闭,用余温继续加热。当溶液出现淡黄、微绿接近无色时,从电炉上取下。若消化过程中溶液颜色变黑,应立即停止加热,冷却后补加适量混酸消化液,按原步骤操作直至消化完全。用10mL蒸馏水冲洗校漏斗及锥形瓶内壁,将锥形瓶置于150℃电热板上蒸发至锥形瓶中液体接近2-3mL,取下冷却至室温。将样品转移至容量瓶中,用少量水多次洗涤锥形瓶,洗液合并到容量瓶中,并用水稀释至刻度,摇匀,此溶液为试样液。
空白液制备
除不称取试样外,均按试样消化步骤进行操作。
标准工作曲线的绘制
精确吸取铁标准工作液0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL,分别置于25mL容置瓶中,加盐酸羟胺溶液2.5mL,摇匀后放置10min,加酒石酸溶液1mL,1,10-菲啰啉溶液5mL,乙酸钠溶液2.5mL,稀释至刻度,摇匀。此时容量瓶中溶液的铁浓度分别为0.00ug/mL、0.40ug/mL、0.80ug/mL、1.20ug/mL、1.60ug/mL、2.00ug/mL。在510nm处测其吸光度,以标准工作液中铁的浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
测定
精确吸取10mL试样溶液、空白液分别置于25mL容量瓶中, 以下按照标准工作曲线的绘制步骤进行。根据试样液的吸光度,从标准工作曲线中查得铁的质量。
平行实验
按以上步骤,对同一试样进行平行试验测定。
结果计算按下式计算样品中铁的含量
X:试样中铁的含量,mg/kg;
A:从标准曲线上查得试样液中铁的质量,ug;
A0:从标准曲线上查的空白液中铁的质量,ug;
V1:测定用消化液的体积,mL;
V2:样品消化液的总体积,mL;
m:称取试样的质量,g。
结果取算术平均值,保留三位有效数字。
精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的10%。1