简介甘草甙的简介
甘草甙,亦名甘草苷。甘草为豆科甘草属植物,其根、茎是常用的中草
药,广泛分布于我国的东北,新疆,云南,内蒙古,安徽等地,《神农本草经》把它列为上品称“此草最为众药之王,经方少有不用者”。甘草的成分复杂,主要含有三萜类,黄酮类,香豆精类化合物, 其中黄酮类是从甘草提取物中得到的一类生物活性较强的成分,其药化学成分主要有甘草素,异甘草素,甘草甙,异甘草甙,新甘草甙等。近年来, 国内外都有关于甘草黄酮类化合物的清除自由基、抗氧化、抗促癌、抗致突的作用的报道1
化学名称4H-1-Benzopyran-4-one, 2- [4-(β-D-glucopyranosyloxy) phenyl]-2, 3-dihydro-7-hydroxy-, (S)
物理性质一水合物 (稀乙醇或水), 熔点 212~213°℃1。
药理作用毒 性:无
不良反应:暂未知
成分来源: 豆科植物光甘草 Glycyrrhiza glabra L. 根, 甘草 Glycyrrhiza uralensis Fisch. 根。
甘草甙的提取甘草原料的前处理甘草原料中的化学成分十分复杂,为获得较好的分离效果以及减少杂质对制备色谱柱的污染,同时提高目标物甘草甙在进样原料中的含量,本实验采取萃取方法对原料进行前处理。如下图 1 用电子天平称取 4 g 干草放入烧杯中,用量筒准确量取 100 mL 蒸馏水倒入烧杯中溶解,超声 15 min 左右,并不断用玻璃棒搅拌,加速溶解。然后将烧杯放入 90 ℃恒温槽中加热 2 h后热过滤,将滤液加入正丁醇溶剂后,静置数分钟后,大部分的甙类溶解于正丁醇溶剂中,接着进行二次萃取,将残留在水中的少量的甙类萃取出来,最后将二次萃取得到的正丁醇溶液合并浓缩,待层析纯化2。
甘草甙层析纯化取 10 mL 上述萃取后的产品作为备用的原料,启动泵,流速设置 25 mL/min,由流动相(甲醇:水=1:4)将原料带入 500 mm×40 mm 的制备柱内,根据出峰的情况收集干草甙产品的馏份:前 1 h 的馏份作为前杂质馏份收集在一起,然后改变流动相比例用 50%的甲醇和水的混合液冲洗柱子,每 20 min 接一次产品,然后用旋转蒸发浓缩各瓶产品后,取 20 µL 进行 HPLC 色谱分析,直到检测无目标物为止。选取高效液相色谱检测条件为:流动相:甲醇:水=3.5:6.5;固定相:硅胶碳 18;色谱柱: 450 mm×4.6 mm;流速 :1 mL/min;检测波长:254nm 对各瓶产品进行检测,得到每 20 min 接一次的产品中,第二瓶甘草甙的含量最高3。
甘草甙再次层析纯化由于经过一次层析纯化后甘草甙的含量不高,所以选取同样的方法,取 10 mL 上述纯化后的产品作为备用的原料流速为 25 mL/min,由流动相(甲醇:水=2:5)将第二瓶产品带入 500 mm×20 mm 层析柱内,根据出峰的情况收集干草甙产品的馏份:每 4 min 接一次产品,然后用旋转蒸发浓缩各瓶产品后,利用上述相同的检测条进行 HPLC 色谱分析,直到检测无目标物为止。经分析发现,得到每 4 min 接一次的产品中,第 6 瓶甘草甙的含量最高,如图 2 其中保留时间为 5.898 min 为目标峰,经面积归一法计算含量达到 40%左右。
产品的后处理将收集的产品在旋转蒸发器上减压蒸馏,温度为 70 ℃,待溶剂基本全部被蒸出后,用少量的甲醇溶解圆底烧瓶上的固体产品后,并到入试管中在室温条件下结晶,直到有白色的粒状晶体出现2。