检测原理
胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯(红色)水解为乙酸与靛酚(蓝色),有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱酯酶有抑制作用,使催化、水解、变色的过程发生改变,由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
使用方法整体测定法选取有代表性的蔬菜样品,擦去表面泥土,剪成1cm左右见方碎片,取5g放入带盖瓶中,加入10ml纯净水或缓冲液,震摇50次,静置2min以上。
取一片农残速测卡,撕去上盖膜,用白色药片沾取提液,放置10min以上进行预反应,有条件时,在37℃恒温箱装置中放置10min。预反应后的药片表面必须保持湿润。
将农药残留快速检测卡对折,用手捏3min或恒温装置中放置3min,使红色药片与白色药片叠合发生反应。根据白色药片的颜色变化判读结果。
每批测定应设一个纯净水或缓冲液的空白对照卡。
表面测定法擦去蔬菜上的泥土,滴2~3滴洗脱液(蒸馏水)在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。
取一片农残速测卡撕去簿膜后,将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。
放置10分钟以上进行预反应,有条件时在37℃恒温装置中放置10分钟。预反应后的药片表面必须保持湿润(不够时再加一滴)。
将速测卡对折,用手捏3分钟或用恒温装置恒温3分钟,使红色药片与白色药片叠合发生反应。
每批测定应设一个洗脱液或蒸馏水的空白对照卡,以作参照。
判断标准与空白对照卡比较,白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果。不变蓝为强阳性结果,说明农药残留量很高,显浅蓝色为弱阳性结果,说明农药残留量较高。白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同,为阴性结果。对阳性结果的样品,可用其他分析方法进一步确定具体农药品种和含量。
检测下限农药残留速测卡对几种常用农药的最低检测限(单位mg/kg)如下:
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注意事项葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有对酶有影响的植物次生物质,容易产生假阳性。处理这类样品时,可采取整株(体)蔬菜浸提。对一些含叶绿素较高的蔬菜,也可采取整株(体)蔬菜浸提的方法,减少色素的干扰。
.农残速测卡对农药非常敏感,附近有农药喷洒或使用卫生杀虫剂,以及操作者手上或器具上沾有微量农药,都会造成对照与检测卡片变色出现误差。
.观察结果时应以红色药片与白色药片叠合发生反应3分钟为准,3分钟后蓝色逐渐会加深,24小时之后颜色会逐渐退去。详细说明请参照国家标准(GB/T 5009.199-2003)《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》
当温度低于37℃,酶反应的速度随之放慢,药品加液后放置反应的时间应相对延长,延长时间的缺点,应以空白对照卡用手指(体温)捏3min时间可以变蓝,即可往下操作(注:若检测量大,可配置恒温水箱或使用用农药残留快速检测仪)。注意样品放置的时间应与空白对照卡放置的时间一致才有可比性。空白对照卡不变色的原因 :一是药片表面缓冲液加的少,预反应后的药片表面不够湿润,二是温度太低,需进行适当的保温。
红色药片与白色药片叠合反应的时间以3min为准,3min后蓝色会逐渐加深,24h后颜色会逐渐褪去。2
保存条件阴凉、干燥、避光保存,有条件者放于4℃冰箱中最佳。农残速测卡开封后最好在三天内用完,如一次用不完可存放于干燥器中,一周内用完。产品保质期一年。