[科普中国]-大肠菌群测试片

原理

Petrifilm大肠菌群测试片采用可再生的水合物干膜，由上下两层薄膜组成。上层聚丙烯薄膜含有粘合剂、指示剂及冷水可溶性凝胶；下层聚乙烯薄膜含有大肠菌群生长所需的VRB培养基。大肠菌群在发育时产生琥珀酸脱氢酶，将上层薄膜中的指示剂还原成红色非溶解性三苯甲，从而使细菌着色，另，测试片表面覆盖的薄膜可留住发酵乳糖的大肠菌群产生的气体。故测试片上红色菌落周围有气泡者，为大肠菌群。2

样品处理取样品25mL（g）放入含有225 mL灭菌生理盐水的取样罐或均质杯内，制成1:10的样品匀液，用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL，注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内，振摇后成为1:100的稀释液。3

接种一般食品选1～2个稀释度进行检测，含菌量少的液体样品（如饮用纯水和矿泉水等）可直接吸取原液进行检测。将大肠菌群测试片置于平坦实验台面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取1mL样品匀液垂直滴加到测试片中央处，然后再将上层膜缓慢盖下，避免产生气泡。使用压板（平面底朝下）放置在上层模中央处。轻轻的压下，使样液均匀覆盖于圆形的培养面积上，切勿扭转压板。拿起压板，静置至少1min使培养基凝固。3

培养测试片的透明面朝上置于恒温培养箱内，堆叠片数不超过20片。培养温度为36℃±1℃，培养24±2h。3

结果判读培养后大肠菌群在测试片上显红色，可目视、用菌落计数器、放大镜或Petrifilm自动判读仪计数，并可参考判读手册计数菌落数。3