[科普中国]-黄曲毒素

简介

1993年黄曲霉毒素被世界卫生组织（WHO）的癌症研究机构划定为1类致癌物，是一种毒性极强的剧毒物质.黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用，严重时可导致肝癌甚至死亡.在天然污染的食品中以黄曲霉毒素B1最为多见，其毒性和致癌性也最强.

黄曲毒素（aflatoxin）是一种有强烈生物毒性的化学物质，常由黄曲霉及另外几种霉菌在霉变的谷物中产生，如大米、豆类、花生等，有很强的致癌作用。加热至280℃以上才开始分解，所以一般的加热不易破坏。

黄曲毒素主要有B1、B2、G1与G2等4种，又以B1的毒性最强。食米储存不当，极容易发霉变黄，产生黄曲毒素。黄曲毒素与肝癌有密切关系，还会引起组织失血、厌食等症状。B1是最危险的致癌物，经常在玉米，花生，棉花种子，一些干果中常能检测到。它们在紫外线照射下能产生荧光，根据荧光颜色不同，将其分为B族和G族两大类及其衍生物。AFT已发现20余种。AFT主要污染粮油食品、动植物食品等；如花生、玉米，大米、小麦、豆类、坚果类、肉类、乳及乳制品、水产品等均有黄曲霉毒素污染。

种类黄曲霉毒素（Aflatoxins）CAS号 1402-68-2，是一组化学结构类似的化合物，已分离鉴定出12种包括B1,B2,G1,G2,M1,M2,P1,Q,H1,GM,B2a和毒醇.黄曲霉毒素的的基本结构为二呋喃环和香豆素,B1是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物.即含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮（香豆素）.前者为基本毒性结构后者与致癌有关.M1是黄曲霉毒素B1在体内经过羟化而衍生成的代谢产物.黄曲霉毒素的主要分子型式含 B1,B2,G1,G2,M1,M2等.其中M1和M2 主要存在于牛奶中.B1为毒性及致癌性最强的物质.

黄曲霉毒素B1（CAS号1162-65-8）；

黄曲霉毒素G1

黄曲霉毒素B2（CAS号7220-81-7）；

黄曲霉毒素G1（CAS号1165-39-5）；

黄曲霉毒素 G2（CAS号7241-98-7）；

黄曲霉毒素M1（CAS号6795-23-9）

黄曲霉毒素M2

特点物化特性在紫外线下黄曲霉毒素B1,B2发蓝色荧光；黄曲霉毒素G1,G2发绿色荧光

黄曲霉毒素的相对分子量为312-346，难溶于水易溶于油，甲醇丙酮和氯仿等有机溶剂，但不溶于石油醚己烷和乙醚中

一般在中性溶液中较稳定，但在强酸性溶液中稍有分解在pH9-10的强碱溶液中分解迅速

其纯品为无色结晶，耐高温。黄曲霉毒素B1的分解温度为268℃

紫外线对低浓度黄曲霉毒素有一定的破坏性

毒性极强对健康的危害黄曲霉毒素进入体内后，主要在肝细胞内质网微粒体混合功能氧化酶系的作用下进行代谢。黄曲霉毒素没有经过代谢活化是无致癌性的，因曲昔曲霍毒素袖称为前致癌物[1]．

远远高于氰化物、砷化物和有机农药的毒性，其中以B1毒性最大。当人摄入量大时，可发生急性中毒，出现急性肝炎、出血性坏死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。当微量持续摄入，可造成慢性中毒，生长障碍，引起纤维性病变，致使纤维组织增生。AFT的致癌力也居首位，是目前已知最强致癌物之一。

检测试剂操作步骤：

1.将所需试剂从微孔板中取出，放置室温(20～25℃)30min以上，液体试剂使用前均须摇匀。

2.取出所需数量的微孔板，将不用的微孔板与干燥剂一起重新真空密封，保存于2～8℃。不要冷冻。

3.洗涤工作液在使用前也需回温。[2]

4.将样本和标准品对应微孔编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

5.加标准品/样本50ml到对应的微孔中，加入酶标物50ml/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光环境中反应30min。

6.小心揭开盖板膜，用洗涤工作液充分洗涤300ml/孔，洗板5次，每次间隔30s，用吸水纸拍干。

7.加入显色液100ml/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光环境反应30min。

8.加终止液50ml/孔，轻轻振荡混匀，设酶标仪于450nm处读每孔OD值。

注意事项

1.室温低于20℃或试剂及样本没有恢复到室温(20～25℃)会导致所有标准的OD值偏低。

2.在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。

3.每种试剂使用前均需摇匀。

4.反应终止液为2M盐酸，避免接触皮肤。

5.不要使用过了有效期的试剂盒；也不要掺杂使用过了有效期的试剂盒；不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。

6.储存条件

7.试剂变质的迹象：显色试剂有任何颜色表明显色剂变质，应当弃之。0标准的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm