[科普中国]-T-H糖蛋白

T-H糖蛋白的定义

Tamm-Horsfall蛋白（THP）是由肾小管髓袢升支及远端小管曲部的上皮细胞合成分泌的糖蛋白。正常情况下，尿液中含有少量的THP。

尿THP测定的临床意义尿THP排出减少见于肾实质病变如慢性肾衰竭及急性肾小球肾炎等导致肾单位大量减少，GFR显著降低时，而单纯下尿路炎症时尿THP水平无变化。尿液THP含量增加见于各种原因如间质性肾炎、尿路长期梗阻、自身免疫性药物中毒、铜和铬中毒等疾病引起的肾脏损伤，并与病情相一致。尿道结石患者体外震波碎石治疗效果判断：碎石成功则尿THP含量逐渐升高，至第二天达峰值，之后逐渐下降；若碎石失败则尿THP含量无变化。

尿Tamm-Horsfall蛋白升高和/或Tamm-Horsfall蛋白抗体阳性，提示肾盂肾炎。

尿液中含量最多的蛋白之一一一T-H蛋白（Tamm-Horsfall protein），可能是一种抑制尿路结石形成的大分子有机物。在草酸钙结晶体外试验的有机质中，及大鼠肾结石模型草酸钙结晶中均发现有THP的存在，同时在乙二醇诱导的草酸钙尿路结石大鼠模型的肾组织及尿液中THP表达量均减少1。但是抑制肾结石形成的机制及其所起的作用，不同的研究得到不同的结果，存在较大争议。这些争议如结石患者与正常人群尿中THP含量的差别、THP抑制结石形成的影响因素、THP在结石形成中所起的作用及与其它结石抑制因子之间的相互关系等等，都有待于进一步研究。虽然国外有研究者报道了肾结石大鼠肾脏组织THP表达的结果,但还没有治疗因素干预下肾结石大鼠肾脏组织表达的研究报道。

构椽酸是研究最早最充分的结石抑制因子之一，但其确切的防石机制，与其他大分子抑制因子之间的关系有待于进一步研究。因此，我们研究构椽酸钾干预下肾结石大鼠肾组织内THP的表达，了解构椽酸钾干预对THP表达的影响，进一步探讨构椽酸钾抑制结石形成的机制，及构椽酸钾与THP之间的相互关系，这不仅为解析肾结石发病机理提供实验依据，对临床寻求肾结石的防治途径也具有一定的指导意义。

提取尿T-H糖蛋白的主要步骤取正常人尿液20升，加入等量蒸馏水稀释。放固体氯化钠于尿液内，使其浓度达。0.58mol/L，充分混匀后于4℃静置48小时，此时，可见白色絮状沉淀物形成。弃去上清液，将沉淀物低温(4℃)离心(3000r/min，30分钟)将离心后的沉淀物用0.58mol/L的氯化钠溶液反复洗3次，然后，溶于一定量的蒸馏水中，对水，置4℃透析3~5天，每日换水4-5次，以彻底清除残留的氯化钠，最终获得无色透明的粒性液体，即为THP。分装，冻干，低温保存备用。将提取的THP，按照蛋白质鉴定方法，进行生物学和免疫学纯度的鉴定。主要包括分子量测定，氨基酸组成分析，抗原与相应抗体的特异性免疫电泳等。经上述检验证实，所提取的THP完全符合要求。

抗T-H糖蛋白杭体的制备将人尿THP作为抗原，免疫新西兰白兔制备抗人THP抗体。方法:每只兔每次用抗原量lmg，与等量完全Ferund佐剂混合，皮下、肌肉多点注射，每2周加强免疫1次，共3次。所得抗血清先经盐沉淀法粗提，后经离子交换层析法纯化。一纯化的抗血清，经双向免疫扩散法鉴定，结果显示与相应抗原呈高度特异性结合呈现一条沉淀线2。