[科普中国]-食品添加剂核黄素（维生素B2）

基本信息

核黄素即维生素B2，是由异咯嗪衍生而成的一种B族维生素。维生素B2分子由异咯嗪基和核糖醇基所组成，为黄色针状晶体，味苦，微溶于水，极易溶于碱性溶液。水溶液呈黄绿色荧光，对光不稳定。小麦、青菜、黄豆、动物的肝和心等内脏都富含维生素B2。医学上应用维生素B2制剂治疗维生素B2缺乏症。成人每天最低需要维生素B2 1.6毫克，儿童为0.6毫克。长期缺乏维生素B2，会导致细胞氏谢失调，首先受影响的是眼、皮肤、舌、口角和神经组织，引起眼角膜炎、口角炎、舌炎和阴囊炎等。

化学名称：7，8-二甲基-10-[（2S，3S，4R）-2，3，4，5-四羟基戊基]-3，10-二氢苯并蝶啶-2，4-二酮

分子式：C17H20N4O6

相对分子质量：376.36（按2007年国际相对原子质量）

现行标准号：GB 14752—2010

中文标准号标准号 StandardNo： GB 14752—2010

中文标准名称 StandardTitle in Chinese： 食品添加剂 核黄素（维生素B2）

英文标准名称： Food additive--Riboflavin （Vitamin B2）

发布日期 IssuanceDate： 2010-12-21

实施日期 ExecuteDate： 2011-2-21

首次发布日期 FirstIssuance Date： 1993-12-9

标准状态 StandardState： 现行

计划编号 Plan No：

代替国标号 ReplacedStandard：

被代替国标号 ReplacedStandard:

废止时间 RevocatoryDate：

采用国际标准号 AdoptedInternational Standard No： FCC Ⅲ:1983

采标名称 AdoptedInternational Standard Name：

采用程度 ApplicationDegree： NEQ

采用国际标准 AdoptedInternational Standard： 其他

国际标准分类号(ICS)： 67.220.20

中国标准分类号(CCS)： X42

标准类别 StandardSort： 产品

标准页码 Number ofPages:

标准价格(元) Price(￥)：

主管部门 Governor： 国家标准化管理委员会

归口单位 TechnicalCommittees： 全国食品添加剂标准化技术委员会

起草单位 DraftingCommittee： 中国医药工业公司1

范围本标准适用于经化学合成法及生物发酵法制得的食品添加剂维生素B2（核黄素）。

规范性引用文件本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。

技术要求1、感官要求

符合表1 的规定。2

检验方法：取适量样品置于清洁、干燥的白瓷盘中，在自然光线下，观察其色泽和组织状态，嗅其气味。

约在280℃时熔融，分解，溶液易变质。在碱性溶液中或遇光变质更快。

表1 感官要求

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2、理化指标

应符合表2 的规定。2

表2 理化指标

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检验方法本标准试验方法中使用的部分试剂具有毒性或腐蚀性，按相关规定操作，操作时需小心谨慎。若溅到皮肤上应立即用水冲洗，严重者应立即治疗。在使用挥发性酸时，要在通风橱中进行。

本标准所用试剂除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T 6682—2008 中规定的三级水。未指明的溶液为水溶液。试验中所用标准滴定溶液和其他所需溶液，在未注明其他要求时，均按GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603 之规定制备。

1、鉴别试验

荧光试验：

维生素B2（核黄素）具芳香环和杂环，有长共轭结构的π→π*跃迁，具有荧光性，在酸、碱性条件下及加入各种还原剂均会使维生素B2（核黄素）转变为无荧光的物质。

取约1mg 实验室样品，加100mL水溶解后，溶液在透射光下显淡黄绿色并有强烈的黄绿色荧光；分成二份：一份中加盐酸溶液或氢氧化钠溶液，荧光即消失；另一份中加连二亚硫酸钠少许，摇匀后，黄色即消褪，荧光亦消失。

紫外-可见吸收光谱鉴别：

维生素B2（核黄素）具苯环结构，有多个共轭双键，其紫外-可见吸收光谱中有三个吸收峰（444nm，375 nm与267nm），用A444nm /A267nm 及A375nm /A267nm的比值来鉴别维生素B2（核黄素）。

实验室样品溶液：避光操作。取约0.075g实验室样品，精确至0.001g，置烧杯中，加1mL冰乙酸与75mL水，加热溶解后，加水稀释，冷却至室温，移置500mL棕色容量瓶中，再加水稀释至刻度，摇匀；精密量取10mL，置100mL棕色容量瓶中，加7mL乙酸钠溶液，并用水稀释至刻度，摇匀。

取实验室样品溶液扫描，在波长444nm±1nm、375nm±1nm与267nm±1nm 处有最大吸收，并测定吸光度（A），计算A375nm/A267nm 的比值为0.31～0.33 和A444nm/A267nm 的比值为0.36～0.39。

红外光吸收图谱鉴别：

在红外灯下进行，以防止吸潮。

将实验室样品和溴化钾粉末置入玛瑙乳钵中研匀，装入压片模具制备样片并进行扫描。本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致。

2、维生素B2 的测定

维生素B2（核黄素）具苯环结构，有多个共轭双键，在波长444nm 处有最大吸收，将样品溶液于该波长处测定吸光度，以百分吸光系数（1%1cm E）计算即得其质量分数。

取实验室样品溶液，在波长444nm ±1nm处，以水为空白对照，测定吸光度（A）。

3、比旋光度的测定

维生素B2（核黄素）的核糖醇侧链2，3，4-位有三个不对称碳原子，具有旋光活性，在碱性条件下，呈左旋光性，以此检查样品的比旋度。

取实验室样品溶液，按GB/T 613 测定。

4、感光黄素的测定

维生素B2（核黄素）几乎不溶于三氯甲烷，杂质感光黄素溶于三氯甲烷，在440nm 处有紫外吸收，因此用三氯甲烷提取感光黄素，排除维生素B2（核黄素）的干扰后，在此波长处测定，作限量检查。但维生素B2（核黄素）在乙醇中稍有溶解，为克服测定时的干扰，所以必须使用无醇三氯甲烷。

实验室样品溶液的制备：称取约0.025g实验室样品，精确至0.0001g，加10mL无醇三氯甲烷，振摇5min，过滤。

测定：取实验室样品溶液，在波长440nm处，以无醇三氯甲烷为空白，测定吸光度（A）。

5、干燥减量的测定

称取约0.5g实验室样品，精确至0.0001g，置于105 ℃±2 ℃干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不可超过5mm， 105 ℃±2 ℃干燥至恒重。

6、重金属的测定

样品中杂质金属在酸性（pH3.5）条件下，与硫化氢或硫化钠试液显色。样品与标准铅溶液同法测定，以此检查其限度。

按《中华人民共和国药典》2005年版二部附录VIII H重金属检查法第二法测定，具体方法如下：取遗留的残渣，加0.5mL硝酸，蒸干，至氧化氮蒸气除尽后（或取1.0g实验室样品，缓缓灼烧至完全炭化，冷却至室温，加0.5mL～1.0mL硫酸，使恰湿润，用低温加热至硫酸除尽后，加0.5mL硝酸，蒸干，至氧化氮蒸气除尽后，冷却至室温，在500℃～600℃灼烧至完全灰化），冷却至室温，加2 mL盐酸，置水浴上蒸干后加15mL水，滴加氨试液至对酚酞指示液显中性，，再加2 mL乙酸盐缓冲液（pH3.5），微热溶解后，移置纳氏比色甲管中，加水稀释成25mL；另取配制实验室样品溶液的试剂，置瓷皿中蒸干后，加2mL乙酸盐缓冲液（pH3.5）与15mL水，微热溶解后，移置纳氏比色乙管中，加1mL±0.01mL标准铅溶液，再用水稀释成25mL；再在甲乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各2mL，摇匀，放置2min，同置白纸上，自上向下透视，甲管中显示的颜色与乙管比较，不得更深。

7、砷盐的测定

称取5.0g±0.01g实验室样品、量取10mL±0.05mL限量砷标准溶液（每1mL溶液相当于1μg砷），分别按GB/T 5009.76—2003第一法中5.2.2干灰化法处理试样后，按第二法砷斑法检测样品。试样的砷斑不得深于标准砷斑。2