[科普中国]-食品添加剂：DL 苹果酸

范围

本标准1适用于以顺丁烯二酸酐、顺/反丁烯二酸为原料经水合反应、浓缩结晶、脱水、干燥而制得的食品添加剂 DL-苹果酸。

规范性引用文件本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的 版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。

化学名称、分子式、结构式和相对分子质量化学名称DL-羟基丁二酸

分子式C4H6O5

相对分子质量134.09 (按 2007 年国际相对原子质量)

技术要求感官要求：应符合表 1 的规定。

表 1 感官要求

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理化指标：应符合表 2 的规定。

表 2 理化指标

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附 录警示试验方法规定的一些试验过程可能导致危险情况。操作者应采取适当的安全和防护措施。

一般规定除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T 6682－2008中规定的三级水。

试验方法中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时， 均按 GB/T 601、GB/T 602 和 GB/T 603 之规定制备。

鉴别试验苹果酸氨盐呈色试验

试剂和材料

氨水溶液：2+3。

对氨基苯磺酸：10g/L。

亚硝酸钠溶液：200g/L。

氢氧化钠溶液：40g/L。

分析步骤

称取 0.5g 实验室样品，精确至 0.01g，置于 50mL 试管中，加入 10mL 水溶解。用氨水溶液中和 至中性,加入 1mL 对氨基苯磺酸溶液,在沸水浴中加热 5min。加入 5mL 亚硝酸钠溶液，再置于水浴加 热 3min 后，加入 5mL 氢氧化钠溶液，试验溶液应立即呈红色。

红外谱图对照

称取约 1mg 实验室样品及 100mg 溴化钾，研成均匀粉末，放入成形器中，压成薄片后用红外光 谱仪测定其吸收光谱，其谱图与附录 B 图 B.1 给出的 DL-苹果酸红外标准谱图一致。

DL-苹果酸含量的测定方法提要

以酚酞为指示剂，用氢氧化钠标准溶液滴定样品水溶液，根据氢氧化钠标准滴定溶液的用量,计 算以 C4H6O5计的总酸含量为 DL-苹果酸含量。

试剂和材料

氢氧化钠标淮滴定溶液：c (NaOH)=1.0mol/L。

酚酞指示液：10g/L。

分析步骤

1 称取2.0g实验室样品，精确至0.0002 g，加40mL无二氧化碳的水溶解，加2滴酚酞指示液， 用氢氧化钠标准溶液滴定至微红色，保持30s不褪色为终点。

2 在测定的同时，按与测定相同的步骤，对不加试料而使用相同数量的试剂溶液做空白试验。

结果计算 DL-苹果酸（以 C4H6O5计）的质量分数 w1，数值以%表示，按公式计算：

式中：

V ——试料消耗氢氧化钠标准滴定溶液(A.4.2.1)体积的数值,单位为毫升(mL)；

V0 ——空白试验消耗氢氧化钠标准滴定溶液(A.4.2.1)体积的数值,单位为毫升(mL)；

c ——氢氧化钠标准滴定溶液浓度的准确数值,单位为摩尔每升(mol/L)；

m ——试料质量的数值,单位为克(g)；

M ——苹果酸（1/2 C4H6O5）的摩尔质量的数值,单位为克每摩尔(g/ mol)(M =67.04)。

取两次平行测定结果的算术平均值为报告结果。两次平行测定结果的绝对差值不大于0.2%。

比旋光度的测定称取4.25g实验室样品，精确至0.001g，加入20mL水溶解，移至50mL容量瓶中，用水稀释至 刻度，摇匀。测定温度为（25±0.5）℃。

比旋光度 αm(25 ,D) ℃ 数值以“( º)·dm2· kg-1”表示，按公式计算：

式中：

α —— 测得的旋光角,单位为度(°)；

l —— 旋光管的长度,单位为分米(dm)；

ρα—— 溶液中有效组分的质量浓度,单位为克每毫升(g/mL)。

其他按GB/T 613进行。

砷的测定称取1.0g实验室样品，精确至0.01g，放入测砷装置锥形瓶中，加入5mL水溶解，加入1滴溴 酚蓝指示液（0.4g/L），滴加氨水溶液（1+4）中和至溶液呈紫色，补水至约35mL，再加入20mL硫酸 溶液（1+5），摇匀，作为试样溶液。使用吸收液B。进行限量试验，量取（2±0.02）mL砷（As）标 准溶液（相当于2.0μg As）制备限量标准溶液。

其他按GB/T 5009.76二乙氨基二硫代甲酸银比色法进行。

铅的测定比色法（仲裁法） 按GB/T 5009.75进行。试样处理按干法消解法进行。临用前，将1mg/mL的铅（Pb）标准溶液稀 释成5μg/mL的铅（Pb）标准溶液。测定时量取（25±0.02）mL试样溶液（相当于2.5g实验室样品）和 （1±0.02）mL铅（Pb）标准溶液（相当于5μg Pb），分别置于125mL分液漏斗中，铅标准溶液中加1% 硝酸溶液至25mL。

原子吸收光谱法 试样处理按 GB/T 5009.75 干法消解法进行。其他按 GB 5009.12 进行。

灼烧残渣的测定称取约 2g 实验室样品，精确至 0.0001g。灼烧温度为(800±25)℃。其他按 GB/T 9741 进行。 取两次平行测定结果的算术平均值为报告结果。两次平行测定结果的绝对差值不大于 0.01%。

富马酸和马来酸的测定方法提要

用高效液相色谱法，在选定的工作条件下，通过色谱柱使样品溶液中各组分分离，用紫外吸收 检测器检测，用外标法定量，计算样品中富马酸及马来酸的含量。

试剂和材料

富马酸：质量分数≥99.0%。

马来酸：质量分数≥99.0%。

氢氧化钠溶液：20g/L。

磷酸溶液：量取磷酸（优级纯）(1±0.02)mL于1000mL容量瓶中，加入100mL甲醇（HPLC 级，可根据柱效调整加入量），加水稀释至刻度，再经0.45μm滤膜过滤。

仪器和设备

高效液相色谱系统(HPLC) A.9.3.1.1 高压泵：无脉冲，能将流速保持在0.1mL/min～10.0 mL/min。

定量环：5μL。

紫外光检测器：可变波长。

数据处理系统：色谱工作站或数据处理机。

抽滤系统 抽滤系统使用孔径为 0.45μm 的纤维素酯膜滤纸（用于流动相的预处理） 。

过滤系统 过滤系统使用孔径为 0.45μm 的纤维素酯膜滤纸（用于样品的预处理）。

进样器 自动进样器或微量进样器，50μL或100μL。

色谱分析条件

推荐的色谱柱及典型色谱操作条件见表3，其他能达到同等分离程度的色谱柱和色谱操作条件均可使用。

表3 色谱柱和典型色谱操作条件

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分析步骤

标准样品溶液的制备

富马酸标准样品溶液的制备

称取 50mg 富马酸，精确至 0.0002g,溶于适量水（必要时加入少量氢氧化钠溶液），转移至 50mL 容量瓶，用磷酸溶液稀释至刻度。 移取上述溶液（1±0.02)mL ,置于 50mL 容量瓶，用磷酸溶液稀释至刻度，摇匀，经 0.45μm 滤膜 过滤，再经超声波脱气处理。

马来酸标准样品溶液的制备

称取 50mg 马来酸，精确至 0.0002g,溶于适量水（必要时加入少量氢氧化钠溶液），转移至 250mL 容量瓶，用磷酸溶液稀释至刻度。 移取上述溶液（1±0.02)mL ,置于 100mL 容量瓶，用磷酸溶液稀释至刻度，摇匀，经 0.45μm 滤 膜过滤，再经超声波脱气处理。

样品溶液的制备

称取 0.2 g 实验室样品，精确至 0.0002g, 置于 50mL 容量瓶，以流动相稀释至刻度，摇匀，经 0.45μm 滤膜过滤，再经超声波脱气处理。

测定

按高效液相色谱操作规程开机预热,调节温度及流量,达到分析条件并基线平稳后,将标准样品溶 液进样。

用微量进样器取标准样品溶液 5μL，进样（或自动进样）,记录所得的富马酸或马来酸的峰面积 A2。

用微量进样器取样品溶液 5μL，进样（或自动进样）,记录所得的待测物质的峰面积 A1。

结果计算

富马酸或马来酸的质量分数 w2，数值以%表示，按公式计算：

式中：

A1 —— 样品液中待测物质的峰面积；

A2 —— 标准样品溶液中富马酸或马来酸的峰面积；

m2 —— 标准样品溶液中富马酸或马来酸的进样量，单位为微克(μg)；

m —— 样品的进样量,单位为微克(μg)。

水不溶物的测定分析步骤

称取 25.0g 实验室样品，精确到 0.1g，溶于 100mL 水中，以干燥至质量恒定的坩埚式耐酸滤过 漏斗过滤后，以热水洗涤漏斗，置于 100℃烘箱中干燥至恒重，冷却称量。

结果计算

水不溶物的质量分数 w3，数值以%表示，按公式计算：

式中：

m1 —— 滤渣质量的数值，单位为克(g)；

m —— 试料质量的数值，单位为克(g)。