[科普中国]-肉与肉制品中喹乙醇残留量的测定

原理

用乙腈和水提取样品中的喹乙醇，提取液经液液净化后，浓缩，定容作为待测溶液，取一定量注入高效液相色谱仪，经分离，用紫外检测器检测，与标准比较定量。

试剂与仪器、设备试剂（1）水：三级水。

（2）乙腈：分析纯。

（3）乙腈：色谱纯。

（4）正己烷：分析纯，重蒸馏，用乙腈饱和。

（5）喹乙醇标准品：纯度99%以上。

（6）喹乙醇标准溶液：精确称取喹乙醇标准品10 mg用甲醇溶解并定容至100 mL，配成浓度为0.100 mg/mL的标准储备溶液，使用时逐级稀释成适当浓度的标准工作溶液。

仪器和设备（1）高效液相色谱仪：附紫外检测器。

（2）组织捣碎机。

（3）离心机：3000 r/min～5000 r/min。

（4）旋转蒸发仪。

分析步骤抽样（1）零散样品
若成堆产品，则在堆放空间的四角和中间设采样点，每点从上、中、下三层取若干小块混为一份样品；若零散样品，则随机从3～5片胴体上取若干小块混为一份样品。每份500 g～l 500 g。

（2）检验批
以不超过5000箱为一检验批。同一检验批内商品应具有同一特征，如包装、标记、产地、规格、等级等。

（3）抽样数量
①肉
a) 500箱及以下取5箱；
b)501～1000箱取7箱；
c) 1001～3000箱取11箱；
d)3001～4000箱取13箱；
e)4001～5000箱取15箱。
②罐头
a) 500箱及以下取5箱；
b)501～1000箱取7箱；
c)1001～3000箱取11箱；
d) 3001～4000箱取13箱；
e)4001～5000箱取15箱。
（4）抽样工具及方法
①肉
每箱取样一包，去掉塑料薄膜，从每包肉样中抽取肉块不少于25g，总样量不少于1 kg，放入清洁的容器内，填写标签，注明品名、日期、垛位、报验号、申请单位、取样人，并及时送交实验室。
②罐头
每箱取一罐，填写标签，注明品名、日期、垛位、报验号、申请单位、取样人，及时送交实验室。

试样制备（1）肉

将所取全部样品，充分搅碎混匀，取有代表性的样品，总量不少于500 g，装入清洁容器内，密封，冷藏。

（2）罐头
将所取全部样品整罐倒出，充分搅碎混匀，取有代表性的样品，总量不少于500g，装入清洁容器内，密封，冷藏。
注：在抽样和制样的操作中，应防止样品受到污染或发生任何变化，以保证实验样品能代表总体样本。
提取和净化
准确称取混合均匀的样品20.00 g(精确到0.01g)置于组织捣碎机中加入80 mL乙腈和20 mL水，捣碎后将样品离心，将上清液倒入500 mL分液漏斗中，向残留物中加入50 mL乙腈，同样均质、离心后，将上清液合并到分液漏斗中，加入100 mL正己烷，振摇5 min，静置分层。将乙腈层转移到250 mL旋转蒸发瓶中，再用20 mL乙腈清洗正己烷层，将乙腈层合并于旋转蒸发瓶中。60℃水浴将乙腈蒸至约1 mL，用流动相定容至5 mL，经0.45μm微孔滤膜过滤后供色谱测定。

测定色谱参考条件a) 色谱柱：ODS C183.9 mm×150 mm；
b) 流动相：乙腈+水(10+90)；
c)流速：1.0 mL/min；
d) 温度：35℃；
e)检测器：紫外检测器；
f)检测波长：380 nm。

测定根据液相色谱仪灵敏度，取标准系列各浓度20 μL分别注入液相色谱仪，测得该浓度标准溶液的峰面积（峰高）。以标准溶液浓度(μg/mL)为横坐标，峰面积（峰高）为纵坐标绘制标准曲线。
取样品溶液20μL注入液相色谱仪，测得喹乙醇的峰面积（峰高）。从标准曲线中查出相应的浓度 (μg/mL)。

结果计算采用外标法用峰面积（峰高）定量，按式(1)计算喹乙醇残留量：

式中

X——样品中喹乙醇残留量，单位为毫克每千克(mg/kg)；

c——样品峰在标准曲线中查得的相应浓度，单位为微克每毫升(μg/mL)；

V——样品最终定容体积，单位为毫升(mL)；

V0——标准溶液进样体积，单位为微升(μL)；
V1——样品溶液进样体积，单位为微升(μL);
m——样品质量，单位为克(g)；
1000--单位换算系数。

允许差本方法允许差≤10%。

最低检出限和回收率最低检出限本方法的最低检出限为0.04 mg/kg。

回收率本方法的回收率在70%～86%之间。

液相色谱图喹乙醇标准色谱图1