[科普中国]-保健食品中肌醇的测定

范围

本标准规定了保健食品中肌醇的测定方法。

本标准适用于肌醇作为功效成分添加于片剂、胶囊、饮料等试样类型中含量的测定。

本方法的检出限为0.02(线性范围是0.1～10 mg/mL)。

原理将固体试样提取液或液体试样稀释液浓缩至干，经硅烷化处理，以正己烷提取，气相色灌氢火焰检测器定性定量检测。

试剂1、无水乙醇

2、正己烷

3、无水硫酸钠

4、三甲基氯硅烷

5、六甲基二硅胺烷

6、二甲基甲酰胺

7、肌醇标准溶液：将肌醇标准品(纯度99%)在100±5℃干燥4h，准确称量0.0500g，溶于70%乙醇溶液，准确配成100.0mL溶液。此溶液每毫升含0.500mg肌醇。

8、硅烷化试剂：将三甲基氯硅烷、六甲基二硅氨烷、二甲基甲酞胺以1：2：8的体积比混合制成，临用时现配。

仪器1、气相色谱仪：附氢火焰检测器(FID)．

2、旋转蒸发仪

3、超声波清洗器。

分析步骤1、试样预处理

（1）取20粒片剂或胶囊试样研磨或混匀，称取一定量(准确至0.001g)于试管中，加入70%乙醇溶液，使浓度为每毫升中大约含肌醇0.5mg，超声提取10 min，在转速为3000 r/min下离心5min，上清液待用。液体试样如浓度过高可用70%乙醇溶液稀释至每毫升含肌醇0.5mg。

（2）准确量取1.0 mL试样溶液于旋转蒸发仪浓缩瓶中，加入5 ml。无水乙醇，于60℃旋转蒸发仪上浓缩至剩有少量液体，之后再每次加入5 ml，无水乙醇直至浓缩瓶中液体完全除去。

（3）向浓缩瓶中准确加入硅烷化试剂5.0 mL，使用超声波振动至瓶中内容物完全分散。再置于70℃水浴中加热10 min。冷却后加入10 mL水，再准确加入3.0mL正己烷，混摇1min后放置10min，在转速为300 r/min下离心5min。取出正己烷层，加入少量无水硫酸钠，轻轻混摇后放置，取上清液进样。准确量取肌醇标准溶液1.0 mL，并按（2）操作，可得肌醇标准衍生溶液。

2、气相色谱参考条件

（1）检测器：FID。

（2）色谱柱：BPS 25m×0.32 nm(i.d.)石英弹性毛细管柱。

（3）气体流速：

载气(N2) 50 mL/min

尾吹气(N2) 50 mL/min

氢气(H2)40mL/min

空气 500 mL/min

分流比 1：50

（4）柱温：190℃。

（5）进样口温度：245℃。 ．

（6）衰减：4。

（7）纸速：2。

3、色谱分析

量取1μl标准及试样衍生液注入色谱仪中，以保留时间定性，以试样峰高或峰面积与标准比较定量。

4、色谱图

色谱图见图1。

在上述色谱条件下．肌醇的保留时间为5.220min．肌醇标准溶液浓度为2.5mg/mL。

5、标准曲线制备

配制浓度为0.1、0.5、2.5、5.0、10.0mg/mL肌醇标准溶液。在给定的仪器条件下进行气相色普分析，以峰面积对浓度作校正曲线。

6、结果计算

X=h1×c×V×100/h2×m

式中：

X一试样中肌醇的含量，mg/100g(mL)；

h1一试样峰高或峰面积；

c一标准溶液浓度，mg/mL；

V一试样定容体积，mL；

h2—标准溶液峰高或峰面积：

m—试样量，g(或mL)。

计算结果保留两位有效数字。

精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%1。