试管婴儿“冬眠”和“苏醒”之----胚胎冷冻和复苏

试管婴儿“冬眠”和“苏醒”之----胚胎冷冻和复苏

前边我们介绍了“试管baby”是通过常规体外受精技术和卵胞浆内单精子注射技术产生，准爸妈心里难免有些疑问？

优质胚胎的安置有两种方式：冷冻保存和移植，我们先来认识一下“冷冻保存”，即试管婴儿“冬眠”和“苏醒”。在采卵后D3、D5或D6，医生会告知准爸妈有“几”个优质胚胎，鉴于没有新鲜移植的条件，您的优质胚胎进行冷冻保存，待子宫内膜准备好后再行复苏后移植。

“冷冻保存”是不是直接将您的胚胎丢进冰箱的冷冻室内，No, No，No。冷冻保存技术是将胚胎或细胞置于含有冷冻保护剂的溶液中，利用特殊的保护措施和降温程序，使胚胎在-196的条件下停止代谢，对其长期保存的过程。在这一过程中，细胞的代谢活动被完全抑制，使胚胎处于静止状态，从而达到长期保存的目的。临床上冷冻保存技术有两种：慢速冷冻和玻璃化冷冻技术。

慢速冷冻是通过设定好的程序缓慢降温，最后投入液氮中冷冻保存，是临床最早使用的冷冻保存技术。慢速冷冻通过低浓度冷冻保护剂梯度脱水，引起胚胎细胞内冰晶形成，对胚胎形成损伤，从而降低了卵子及胚胎的临床结局。慢速冷冻还需要昂贵的仪器，整个冷冻过程时间长，在临床上已经逐渐被淘汰。

玻璃化冷冻通过高浓度的冷冻保护剂快速置换细胞中水，随后直接投入液氮中立即固化。快速冷却，高浓度的冷冻保护剂使胚胎细胞形成透明的玻璃状固体，避免了冰晶形成，也提高了降温速率。玻璃化冷冻由于简便易行，减少细胞损伤，冷冻复苏的存活率达98%以上，且移植成功率在50～60%，已是胚胎学家冷冻“试管baby”的常规冷冻保存方法。

冷冻胚胎，也就是常说的“冻胚”可以直接使用吗？回答是“不能”。患者冷冻的胚胎不管是卵裂期（第三天），还是囊胚期，都称为“冻胚”。冻胚在-196度液氮中“冬眠”，需要“唤醒”沉睡状态的胚胎，才可以用于后续治疗，这个“唤醒”过程即为复苏。液氮中“冬眠”的胚胎细胞内是高渗状态，从液氮中取出后，立即放入形成低渗环境的含有非渗透性冷冻保护剂的复苏液中，通过由高到低浓度的复苏液，胚胎细胞逐渐恢复等渗状态，从而“唤醒”了胚胎。随着辅助生殖技术水平的提高，冷冻复苏胚胎移植比例也逐渐增高。冷冻复苏技术的优势：一、可以合理限制移植胚胎数，降低多胎妊娠率；二、为胚胎移植失败或流产患者提供再次移植机会；三、目前国内倡导二胎、三胎政策，冷冻复苏移植技术可以保存过剩胚胎等生育力，节约了患者的治疗费用。

下边关于冷冻保存的常见问题进行解答：

1、冷冻胚胎的适用对象？

答： 1）IVF或ICSI新鲜治疗周期过程中胚胎移植后剩余优质胚胎；2）新鲜治疗周期因母体因素（卵巢过度刺激、子宫内膜不合格、发热等）不适合移植，可将优质胚胎冷冻保存待移植；3）卵巢功能降低、高龄等患者，可冷冻保存积攒优质胚胎用于移植；4）行胚胎移植前遗传学诊断或筛查的患者；5）生育力保存。

2、胚胎冷冻原因？

答：在国家倡导生育二胎、三胎的政策下，而体外受精-胚胎移植的高昂费用、有限成功率和多余胚胎的存在，以及政策和伦理对胚胎移植数目的限制，从最大限度地保护患者利益出发，应尽可能提高每一取卵周期的临床妊娠率，因而胚胎冷冻技术极为重要。

3、“冻胚”是指什么？

答：D3 卵裂期胚胎 或 D5 囊胚期胚胎的冷冻保存都被称为“冻胚”，其中囊胚期的冷冻保存成功率要显著高于卵裂期胚胎。每个周期获得囊胚形成率为25～30%（按照卵子数为分母），卵裂期胚胎形成率为50～60%（按照卵子数为分母），因此患者要结合自身特点，听取医生医嘱，选择合适自己的胚胎冷冻时期。

4、冷冻保存对患者年龄有限制吗？

答：理论上没有年龄限制，国内专家共识提示若女方年龄>52岁，不建议冷冻保存胚胎。

5、胚胎冷冻保存安全吗？可以保存多长时间？

答：国内专家共识：冷冻保存对胚胎妊娠率、出生缺陷没有显著影响，国际一些研究结果显示冷冻胚胎的复苏移植是安全的。在稳定的液氮环境及自然界辐射下，胚胎可以保存2000年以上，由于长期冷冻可能带来的生育风险及社会伦理问题，中国专家共识建议冷冻保存期限不超过10年。