科普在线 | 围产期干细胞冻存超过29年，细胞活率仍保持高水平！

液氮冻存技术与细胞研究及应用的羁绊十分深厚。由于氮气是一种无色无味、化学性质不活泼的气体，基本不会对冻存物体的化学性质产生影响，是一种优秀的冷却剂选择。**液态的氮气温度低至-196℃，处于该温度下物体中的内能极小，分子运动趋近于停止。**保存于液氮中的细胞仿佛“时间暂停”一般，生命活动在此刻停止。尽管低温能够长期保存细胞，但从室温短时间内降至-196℃，跨越200度的温差却并不是一件容易的事情。这是因为细胞内部充满水分，急速的降温将导致细胞内的水分形成细小冰晶，损坏细胞脆弱的膜结构，细胞也就随之死去。

得益于冻存技术的发展，研究人员开发了多种用于细胞冻存的溶剂，并且为了控制降温速率还开发了名为**“程序降温仪”**的设备，让细胞能够有充足的时间适应低温，通过使用冻存液以及稳定缓慢的降温速率实现细胞安全冻存。有了现代冻存技术的保障，细胞得以在液氮中长期保存，若排除其他外部因素，理论上细胞是可以“永久”保存的。

**围产期干细胞是一种珍贵的细胞资源，目前已被广泛应用于临床治疗如急性白血病、多发性骨髓瘤等血液系统疾病研究中，并取得了瞩目的成果。**倘若没有液氮冻存技术的保障，从娩出新生儿脐带中采集制备干细胞到临床应用干细胞治疗疾病，那是一件难以想象的事。

那么随着干细胞低温冻存时间的延长，倘若需要使用这些干细胞样本，细胞经过漫长的深低温冻存后，在几分钟内回到37℃时，温度变化十分剧烈，细胞能否保持高质量成为了最大的疑惑。研究人员为我们解答了这个疑惑。2018年，在国际期刊Journal of Immunotherapy上的一项研究，报道了短期冻存（＜1年）及长期冻存（1-10年）下干细胞中NK细胞的功能差异，结果发现液氮冻存的时间长短并不会影响NK细胞的扩增及抗肿瘤功能[1]。在更早时候的2011年，一篇发表于International Journal Of Hematology的研究报告[2]，评估了液氮冻存10年后用于造血干细胞移植的细胞质量，结果发现复苏后的干细胞中TNC、CD34+阳性细胞以及CFU-GM均与对照组干细胞无显著差异，提出了长期冷冻保存不会对用于造血干细胞移植的干细胞质量造成负面影响的观点。

上述报道中的干细胞冻存10年仍然有效，那么冻存时间更长一些呢？Cytotherapy上的一项研究表示，干细胞最长冻存17.8年后，造血干细胞（CD34+细胞）仍然存活，与冻存前无显著差异[3]。近日，Stem Cells Translational Medicine上的一项研究报道，干细胞冻存超25年，部分样本超29年后复苏，TNC活率、CD34+阳性细胞等指标仍然保持高水平（88.91±5.01%、90.73±3.69%），再次表明低温冻存不会对干细胞造成负面影响[4]。

最后，细胞冻存技术不仅能够保存围产期干细胞，包括免疫细胞（如NK细胞，T细胞等）、脂肪间充质干细胞等以及各类成体细胞均通过液氮冻存实现长期保存的目的。液氮冻存技术可以说是细胞研究与应用领域中最为重要的技术之一。

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