检测方法
1.葡萄糖氧化酶法
(1)原理 葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化反应中释放过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶催化下与色原性氧受体缩合为红色化合物,此物质在505nm处有最大吸收峰,其吸光度值和葡萄糖量成正比。
(2)步骤 将血清和酶酚混合试剂混匀,置于适宜环境中保温保存,反应完毕后用调零过的分光光度计测定产物于505nm处吸光度值。根据光度值查表或计算可得到样品中葡萄糖浓度。
2.己糖激酶法
(1)原理 葡萄糖在己糖激酶和镁离子存在下可同腺嘌呤三磷酸腺苷(ATP)反应,其产物葡萄糖-6-磷酸在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶催化下可使NADP+还原为NADPH。测定NADPH在340nm处生成量,其生成量与标本中葡萄糖含量成正比。
(2)步骤 可用自动生化分析仪进行检测,将样品同酶混合试剂按比例混合后放入自动生化分析仪,可测定其吸光度增加速率,可根据标准曲线或公式得出样品中葡萄糖浓度。
正常参考值
1.空腹血糖:3.9~6 .1mmol/L(葡萄糖氧化酶法或己糖激酶法)。
2.脑脊液葡萄糖定量:成人为2.5~4.5 mmol/L(葡萄糖氧化酶法),儿童为2.8~~4.5 mmol/L(葡萄糖氧化酶法)。
3.24小时尿糖定量<0.15mg/24h。
4.尿糖定性检测为阴性。
临床意义
葡萄糖测定常用的两种方法中,葡萄糖氧化酶法准确度和精密度符合临床要求,操作简便,是血糖测定的常规检验方法,也可用于脑脊液葡萄糖浓度测定;己糖激酶法为国际临床化学和实验室医学联盟(IFCC)推荐的参考方法,其结果不受轻度溶血、黄疸、肝素等因素干扰,可用于尿糖定量检测。不同样本的葡萄糖测定可为相关疾病诊断、疾病情况及治疗效果评提供参考,长期血糖监测可评估糖尿病治疗血糖的控制情况,并可据此调整治疗方案。