​不可思议！只需25步，用一块芯片就能把皮肤变成血管、神经细胞

用一张芯片把你的皮肤组织瞬间变成血管或神经细胞，这听起来实在是太过科幻。然而印第安纳大学和俄亥俄大学的研究人员不但将其成了现实，还将芯片的制作技术全部开源。也就是说如果你掌握所需的医学知识，在五到六天之内就能按照说明书制造出一款自己中意的 VIP 组织转换芯片！

在这篇刊登于 Nature Protocols，名为 Fabrication and use of silicon hollow-needle arrays to achieve tissue nanotransfection in mouse tissue in vivo 的论文中，印第安纳大学的科学家们详细阐述了这种非侵入式且对人体无害的黑科技。利用电穿孔技术，你可以在毫秒内将质粒 DNA 直接导入到小鼠（或自己）皮肤的特定深度，将皮肤转染为血管或神经细胞。

nanotransfection 示意图 | 来源：印第安纳大学

作者称，这种“组织纳米转染技术”（tissue nanotransfection, TNT）所需要的设备是可以标准化批量生产的。“组织纳米转染技术”的最大优点是不需要用病毒作为载体，从而最大限度地降低了炎症反应和细胞死亡的风险。

发明这项技术的印第安纳再生医学和工程中心（Indiana Center For Regenerative Medicine And Engineering）主任 Chanda Sen 表示：“这篇论文将让更多人一同参与到再生医学中来。”

制备空心微针阵列

根据“纳米转染”说明书，改变组织功能共分为三个步骤（共 25 个具体操作环节）：制备空心微针阵列、制备 TNT 器件，以及对细胞进行转染。首先要考虑的是使用哪种微针阵列，各种不同形态的微针总有一款适合您。对于在局部皮肤导入质粒 DNA，作者建议使用尖端扁平的微针（见图 1A）。对于深层组织的导入，作者建议使用尖端锋利的微针以促进组织穿透( 见图 1B 或 1C)。

各种微针 | 来源：论文

选好款式以后我们就要进行手工制作了。

首先需要在双面抛光的 4 英寸硅（Si100）晶片上覆盖一层光刻胶，然后使用博世（Bosch）工艺对晶片进行深反应离子刻蚀（DRIE）。根据转染需要可以制备三种不同的硅空心微针，包括顶端扁平的一型（图 1E，Type I），顶端突出的二型（Type II）或带有偏心孔的三型（Type III）（图 1F，g)。后两种尖端锋利的微针阵列更有助于穿透到组织当中。

如果将针头的纳米通道直径缩小，那么针头输出生物分子的速度也将相应增加；但是相应来说，这也可能限制通过针头的分子总量。在纳米通道直径过小（250 V）会增加驱动力，并在细胞膜上产生更大的孔隙，这有助于质粒的传递。但如果电压太大的话就会对细胞产生毒性。

作者表示，这款带有硅空心微针阵列的 TNT 芯片的最终目标是对组织进行重新编程。在这款芯片的帮助下，实验小鼠避免了后肢的组织坏死，甚至移植到大脑的神经细胞还改善了中风小鼠的神经功能。

目前，科学家们还没有在人类身上进行大规模的临床试验。但在制备纳米芯片的方法开源以后，想必会引来大批生物骇客的兴趣。

届时又会有怎样神奇的发现，我们拭目以待。

参考文献：

https://www.nature.com/articles/s41596-021-00631-0

撰文：刘芳

编审：HS

排版：李雪薇

来源：学术头条