鹅细小病毒感染的流行病学、临床特征、诊断技术与防控措施

1 流行病学

病原。鹅细小病毒（GPV）是细小病毒科、细小病毒属的成员，其生物学特性与番鸭细小病毒类似，通过电镜观察发现病毒颗粒为圆形或者六角形，呈20面体对称的晶格排列，直径大约为20～24nm，没有囊膜，属于DNA病毒。由于该病毒不具有囊膜，因此具有较强的抵抗环境的能力，如在56℃下经过3h加热才会失活，且对胰酶、去污剂以及低pH条件等不敏感。

易感动物。在自然感染条件下，只有雏鹅和雏番鸭可感染发病，其他禽类和哺乳动物不会感染。3～20日龄的雏鹅易感，且不同日龄、不同免疫情况的鹅群以及不同地区在发病率和病死率存在一定差异，但越小日龄发病有越高的病死率。

传播途径。该病主要经由粪口途径进行传播，即该病的主要传播方式是直接接触病鹅或者通过污染病毒的饲料、用具、种蛋等进行机械传播。

2 临床症状及剖检变化2.1 临床症状小于15日龄的雏鹅无论是自然感染还是人工感染，潜伏期通常都在3～5天；大于15日龄的易感雏鹅无论是自然感染还是人工感染，潜伏期相比于前者要延长1～2天。

该病主要是导致病鹅消化系统和神经系统出现症状。根据病程持续时间的长短可分成三种类型，即最急性型、急性型和亚急性型。

最急性型。多是小于7日龄的雏鹅易发，其往往突然出现发病和快速死亡，一般在精神沉郁后的数小时内就变得衰弱，或者倒地双腿胡乱划动，很快死亡。另外，患病雏鹅的鼻孔存在少量的浆液性分泌物，只需要几天就会蔓延至全群。

急性型。多是7～14日龄的雏鹅易发，患病后主要表现出精神沉郁，食欲不振或者废绝。经过大约12h，病鹅往往可见神情呆滞，缩颈闭眼，行动缓慢、无力，无法稳定站立，经常蹲伏，停止采食，但增加饮水，排出黄绿色或者黄白色的稀粪，且粪便附着在肛门周围。另外，病鹅张口呼吸，鼻孔四周污秽不洁，喙端发绀，蹼颜色暗淡，嗉囊变得松软，里面存在液体和气泡，机体脱水，眼结膜干燥，最终由于休克而死，临死前会有抽搐或者双腿麻痹的现象，病程通常可持续大约2天。

亚急性型。通常在流行后期出现，多是大于14日龄的雏鹅易发，患病后表现出精神不振，采食减少或者停止，鼻孔存在分泌物，动作缓慢，无法稳定站立，往往蹲卧，伴有腹泻，且粪便污染肛门周围。病程持续时间略长，通常为3～7天或者更久，均能够自愈。

2.2 剖检变化主要是肠道发生病变，即小肠各段都发生充血、严重肿胀，存在大量黏液，黏膜上存在少许蛋花样的黄白色纤维素渗出物，且中下肠段覆盖一层淡黄色的假膜，有时可见细条状的凝固物，导致小肠呈现"香肠状"病变。

最急性型。剖检可见十二指肠黏膜由于充血而呈现弥漫红色，且表面存在大量的黏液。

急性型。剖检可见肠道发生特征性病变，多是小肠的中段和下段出现，尤其是接近回盲部和卵黄囊柄的肠段，外观明显膨大，其体积往往可达到正常肠段的3～4倍，如同香肠状，触感紧实。剪开膨大处的肠壁，发现肠壁变薄、紧张，肠腔中存在凝固的淡黄色或者淡灰白色的栓子状物，其是由凝固的纤维素性渗出物和坏死肠黏膜组织构成，导致肠腔被彻底堵塞。

亚急性型。剖检主要是发生急性卡他性肠炎，同时肝脏呈黄红色或者深紫红色，并发生肿大，胆囊明显膨大，含有大量暗绿色的胆汁；脾脏和胰腺都发生充血，有时会存在灰白色的坏死点。

3 实验室诊断技术3.1 血清学诊断技术病毒中和试验。其基本原理是抗原抗体反应，即在病毒的关键性位点结合对应的抗体后就不能够正常吸附和感染，从而无法导致细胞病变（CPE），这是一种最常用旳血清学诊断方法。

酶联免疫吸附试验（ELISA）。该法是目前生物学领域中一种最常用的检测技术，且已经逐渐作为常规手段用于检测动物流行的病原体。该技术具有安全性好、操作简单、敏感性高、结果快速的优点，常用的有双夹心ELISA法、斑点ELISA法，通常只需要3～4h即可做出诊断，适合在鹅群发病早期进行诊断。但由于该技术需要制备单克隆抗体，使其在在基层兽医的临床上推广受到一定限制。

免疫荧光诊断法。该方法包括直接荧光法和间接荧光法。其中直接荧光法是实验室中比较多用的检查方法，是指在抗体或者抗原上标记荧光素，接种用其进行抗原抗体反应，其特点是敏感性高、特异性好、耗时短等，但由于依旧存在非特异性染色的问题，导致判断结果存在较大的主观性；间接免疫荧光法是指将待检病料制成触片或者切片，接着分别滴加标准抗GPV的阴性、阳性血清，最后加入用荧光标记的二抗进行显色，但要求必须配置使用荧光显微镜。

胶体金免疫层析技术。该技术已经在多方面的检测中被应用，其提点是操作简便、不需复杂仪器、特异性强、敏感性高，且检测结果直观等。

3.2 分子生物学检测技术PCR技术。该技术是目前各种病毒学诊断技术中敏感性最高的一种检测方法，其优点是特异性好，能够一次性对较大量的标本进行检测，无需要进行病毒分离和提纯。

原位杂交技术。该技术是通过地高辛标记的GPVSS DNA探针来检测鹅细小病毒，这是由于该探针只可与病毒的核酸发生阳性反应，而不会与鹅胚尿囊液、正常鹅胚组织以及鹅肝等组织发生反应，因而其灵敏度非常高、特异性非常强。另外，该技术能够准确且快速地、检测出是否存在鹅细小病毒核酸，且有较高的重复性。

环形等温扩增技术。该技术的要点是针对目的片段的6个区域设计4条特异性引物，在大约65℃恒温条件下，借助链置换DNA聚合酶对目的片段进行高效扩增，其优点是操作简便、灵敏度高、特异性强、耗时短等，且无需任何贵重的仪器，只需要一个水浴锅即可完成操作，通常在兽医基层部门的实验室诊断和野外的临床诊断中适用。

4 防控措施4.1 疫情处理发现病鹅后立即隔离，对病死鹅必须采取深埋处理，并先清扫干净鹅舍，接着使用高压水冲洗，然后泼洒2%氢氧化钠溶液进行消毒，同时将食槽、饮水器浸泡在1%高锰酸钾溶液进行消毒，还要配合进行带鹅消毒，每周至少3次，连续进行2周。

对于没有发病的雏鹅，可每只皮下注射0.5～0.8mL高效价抗血清或者1.0mL精制蛋黄抗体，注意在血清或蛋黄抗体中可添加适量的广谱抗菌药；对患病雏鹅，可每只皮下注射1.0mL高效价抗血清或者1.5mL精制蛋黄抗体，同时按每千克饮水添加4g电解多维混饮，可使治愈率提高，并减少发生应激。

4.2 免疫接种目前，预防该病的发生主要是给鹅群免疫接种鹅细小病毒疫苗，可选用活疫苗和灭活疫苗两种，其中灭活疫苗具有安全、便于贮存以及免疫期长的优点，适合在临床上应用。

推荐免疫程序：种鹅在开产前20天进行首免，在120日龄进行二免，每次每只接种1mL疫苗；雏鹅在3日龄进行首免，每只接种0.5mL疫苗，之后在90日龄进行二免，每只接种1.0mL疫苗。对于没有母源抗体的雏鹅，由于会存在抗体空白期，最好在出壳后配合使用高免疫血清或者卵黄抗体来预防发病。