马铃薯脱毒快繁技术

　　品种克新1号大田生产薯块。茎尖组织培养基的选用培养基：MS+0.1 mg•L-1 NAA+0.1 mg•L-1 6-BA+0.1 mg•L-1 GA3，PH值5.8～6.0。茎尖剥离：在严格的无菌环境中，在30-40倍解剖镜下进行茎尖分生组织剥离。用接种针小心除去茎尖周围的叶片组织，暴露出顶端圆滑的生长点，用接种针细心切取所需的茎尖分生组织。一般切取茎尖的长度为0.1-0.2mm、带有一二个叶原基的茎尖，接种于配制好的茎尖组织培养基中，放入培养室内进行培养。培养条件培养温度22-25℃，湿度80%-85%，光照强度2000-4000lx，每天光照16天。30-40天茎尖明显增长后结合（37±1）℃热处理6-8周。期间经常观察，及时去除污染苗、变褐死亡苗、生长不良的植株，将剩余的大部分生长正常的苗经3-4个月培养形成的小植株在继代培养基中再增殖一次，待植株生长到一定大小时进行病毒检测。病毒检测方法有多种，如生物学测定法、酶联免疫吸附法（ELISA）、植株直接测定法。我们采用的是酶联免疫吸附法（ELISA），根据检测结果，将含有病毒的株系淘汰掉，保留下完全不含病毒的株系，这样即获得了脱毒马铃薯基础材料——马铃薯脱毒试管苗。马铃薯茎尖脱毒成功率的高低，除受茎尖大小影响之外，还受人员操作因素的影响。一般来讲，剥离的茎尖越小，所带病毒越少，获得无病毒植株的机会就越高，但培养越困难；离体茎尖越大，虽成活率提高，但脱毒效果降低。理想的茎尖大小是0.1-0.2mm，带有一二个叶原基。根据资料介绍，在正常情况下，离体茎尖脱毒成功率一般在4％-5％之间。我们的试验也证明，随着技术人员操作的逐渐熟练，脱毒成功率也将逐渐提高。 编辑：卜晓冬审核专家：山西省农科院推广处研究员 马宏斌