实验动物新品系和人类 疾病动物模型研究成功案例

　　首头代孕母猪顺产的4头新生仔猪。（图片来源：科技日报）

　　经过十多年锲而不舍的研究，顾为望教授率领的科研团队先后成功培育出FMMU 白化豚鼠、SPF新西兰兔和实验用西藏小型猪，现已基于小型猪成功制备了小型猪糖尿病模型、小型猪辐射损伤模型以及小型猪肺动脉损伤模型，微型巴马猪，小型猪高血糖家系，先天性心脏病小型猪模型，白化西藏小型猪等；同时中心与中国科学院广州生物医药与健康研究院合作，成功制备了红、黄、蓝、绿四色荧光蛋白转基因克隆猪、亨廷顿舞蹈症的转基因克隆西藏小型猪、Mx1（抗黏液病毒1）转基因克隆西藏小型猪。

　　白化及免疫缺陷小型猪的培育

　　顾为望教授的科研团队采用最新基因编辑技术敲除西藏小型猪的酪氨酸酶基因和免疫相关基因，获得了白化及免疫缺陷西藏小型猪新品系。移植的3 头代孕母猪均怀孕成功，于2016 年12 月17 日，首头代孕母猪顺产4 头新生仔猪。另外2 头预计将于春节后产仔。

　　此次实验首次运用最新基因编辑技术对西藏小型猪的受精卵体外进行基因改造，然后进行胚胎移植。与体细胞克隆技术相比，操作相对简单，有效克服了体细胞核移植技术的某些不足。可简便高效地在较短时间内获取不同性别的个体，便于迅速繁殖育种。在已出生的4 头新生仔猪中，其中2头白化个体，1 头为黑白相间毛色，1 头为黑色。特别欣喜的是，产出的2头白化小型猪1雌1雄，可以迅速育种，预计产出的白化猪很快可以产业化生产，从而广泛应用于生物医药研发。这标志着经广东省科学技术厅立项的重点攻关项目“构筑制作遗传工程小型猪的社会化服务支撑平台”取得突破性进展，该成果的取得也必将促进顾为望教授主持的“广东省实验小型猪种质资源建设暨检定用小型猪培育工程技术研究中心”和南方医科大学高水平大学建设，同时该平台将为广州及周边地区的生命科学和药物研究提供小型猪动物模型制作技术。

　　以免疫缺陷猪为基础开展人源化细胞的研究

　　制备人源化肝脏小型猪模型是将人胚胎干细胞分化的肝脏细胞移植到免疫缺陷小型猪的肝内，通过人源化干细胞源性肝细胞的增殖替代损伤的猪肝脏。定期采取猪血并测定人血清蛋白的含量来判定人源肝脏细胞的增殖，实施部分肝切除手术切取猪部分的肝脏进行定量分析人源肝脏细胞的增殖的比例。

　　小型猪生产的人源化肝细胞可为肝病治疗和疗效评价奠定基础。猪生产的人源化肝细胞可用于治疗肝硬化、肝坏死以及各种化学药物所致的肝脏损伤。猪生产的人源化肝细胞用于制作生物人工肝可更有效的治疗肝衰。在此基础上制备的人源化肝脏可以用于临床异种移植研究，此项目的成功实施，不仅是医学史一个重大的突破，而且会带来很好的社会价值和经济价值。