[科普中国]-农药免疫分析技术

农药残留的免疫分析方法是在已有免疫学实验的基础上建立起来的，因此它的免疫学反应原理及操作过程都与其他免疫检测方法相类似。用于农药残留免疫分析反应的类型绝大多数是抗体或抗原竞争型反应。

免疫分析法免疫分析法(InununoassayIA)是一种抗体作为生物化学检测器对化合物、酶或蛋白质等物质进行定性和定量分析的分析技术。20世纪90年代以来它在检测粮食、水果、蔬菜、肉、奶、水和土壤中农药的残留分析上得到迅速发展，成为优先研究、开发和应用的一项分析技术。

免疫分析法具有特异性强、灵敏度高(检测极限可达1～1000ng/ml)、方便快捷、分析容量大、检测成本低、安全可靠等优点。一般不需要贵重仪器，可大大简化甚至省去前处理过程，对使用人员的专门技术要求不高，容易普及和推广。该技术开发的产品—检测试剂盒，可广泛应用于现场样品和大量样品的快速检测。

因此，人们称免疫分析技术是21世纪最具竞争性和挑战性的检测分析技术。

免疫分析标记抗体的类型农药残留的免疫分析方法是在已有免疫学实验的基础上建立起来的，因此它的免疫学反应原理及操作过程都与其他免疫检测方法相类似。用于农药残留免疫分析上的抗体标记方法主要有4种类型，即放射性标记、酶标记、生物素标记和荧光抗体标记。早期的农药残留免疫分析标记抗体主要是以碘标记为主，但由于这种标记方法半衰期短，而且对环境和人有潜在的危险性，因而逐步被酶标记所替代，由此建立的方法称为酶免疫分析法(EIA)：酶标记的抗体保存期长，具高敏感性，显示结果直观并可进行光谱分析，这为农药残留定性、定量分析带来很大的方便。标记在抗体上的酶主要是辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶和S-半乳糖苷酶在检测过程中，当加人适当的底物时产生特殊的颜色反应，用于检测此外，生物素标记和荧光抗体标记检测农药残留的应用也有不少报道1。

农药残留免疫分析检测方法用于农药残留免疫分析反应的类型绝大多数是抗体或抗原竞争型反应，其检测方法有两种：一种是抗原捕获法，将已知量的标记抗原与含有未知量的待测抗原混合在一起，然后将该混合液与吸附在固相上的亚饱和量抗体孵育，检测液中含量高的抗原将减少标记抗原的结合，这样通过已知标准曲线定量出不同目标检测物的浓度；另一种是“三明治”分析法，是先把抗原吸附在固相上，然后将混有待测抗原的一抗抗体混合液与吸附在固相上的抗原孵育，冲洗掉已结合的抗体，再加人酶标记的二抗抗体与其共同孵育，最后测定标记抗体上酶催化底物产生的光吸收值的大小来确定农药残留的量，也可将一抗抗体直接用酶标记，然后测定结台抗体上的酶所催化底物产生的颜色反应。酶标记反应的固相支持物有聚苯乙烯、塑料管、膜和微球。目前大多数采用96孔酶标板(MTP)作为固相支持物，这种板的检测容量大，样本数量多，其检测反应结果只需有酶标仪的配合就可得出准确的检测数据，与其他检测手段相比，此种方法更易被使用者接受2。

本词条内容贡献者为:

梁志宏 - 副教授 - 中国农业大学