[科普中国]-肉与肉制品总磷含量测定

肉与肉制品总磷含量测定，现行标准号为GB/T 9695.4-2009，该标准代替了原GB/T 9695.4-1988（现已废止）。GB/T 9695.4-2009由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会于2009年4月8日发布，适用于肉与肉制品中总磷含量的测定方法，分光光度法的检出限为0.1mg/kg，自2009年5月1日起开始实施。1

沉淀称量法原理试样经干法灰化或湿法消化，制成稀酸溶液，在5%~10%的硝酸酸度下，磷酸根与钼酸钠和喹啉反应生成磷钼酸喹啉沉淀。经过洗涤后，在180℃ ±20℃ 下烘干称量，求出磷的含量。

反应式为：

H3PO4+12Na2MoO4+24HNO3+3C9H7N=(C9H7N)3H3PO4·12MoO3· H2O↓+24NaNO3+11H2O

试剂若无特别说明,所用试剂均为分析纯,所用水应符合GB/T 6682的要求。2

盐酸；硝酸；高氯酸；盐酸溶液:盐酸+水=1+1；硝酸溶液:硝酸+水=1+1；丙酮；钼酸钠；柠檬酸；喹啉；喹钼柠酮沉淀剂；混酸消化液：硝酸+高氯酸=7+1。

仪器和设备分析天平：可准确称重至0.001g；坩埚:瓷坩埚或石英坩埚；机械设备：用于试样的均质，包括绞肉机、斩拌机等肉类组织粉碎机；马弗炉：可控温550℃± 20℃；干燥箱：可控温180℃ ±20℃ ；电热板；G4坩埚。

分析步骤1. 试样液制备

1）试样准备

按GB/T 9695.19规定的方法取样3。至少取有代表性的试样200g，使用适当的机械设备将试样均质。均质后的试样尽快分析，否则应密封低温贮存，防止试样变质或成分发生变化。贮存的试样在启用时，应重新混匀。

2）试样消化

A.干灰化法

称取1g~2g试样(精确至0.001g)放人坩埚中，置于130℃ ±10℃ 的干燥箱中烘1h，使试样脱水。将坩埚在可调电炉上缓慢加热，使试样炭化，开始时用小火加热，以防止试样溅出，待大烟冒过后提高温度，使试样完全炭化，直至不冒烟为止。炭化好的试样放入马弗炉中，于550℃ ±20℃下灰化2h。灰化好的试样应是灰白色，若灰分中有黑色碳粒，应取出坩埚，冷却至室温后，加硝酸溶液湿润，然后在电热板上烘干后，再置于550℃ ±20℃马弗炉中灰化，直至灰分成灰白色。

灰化好的试样用1.25mL盐酸溶液溶解，转移到25mI'容量瓶中，用少量水冲洗坩埚多次，合并洗液，用水稀释至刻度，摇匀。此溶液为试样液，备用。

B. 湿消化法

称取1g~2g试样(精确至0.001g)，放入100mL锥形瓶中，加人混酸消化液20mL，放入2粒玻璃珠，盖上小漏斗，静置过夜。样品在可调电炉上低温缓慢加热，以防产生大量泡沫和喷溅，消化至溶液颜色变浅，并有大量白烟时，将电炉关闭，用余温继续加热。当溶液出现淡黄、微绿接近无色时，立即停止加热，并将其从电炉上取下。若消化过程中溶液颜色变黑，应立即停止加热，冷却后补加适量混酸消化液，按原步骤操作直至消化完全。用10mL蒸馏水冲洗小漏斗及锥形瓶内壁，将锥形瓶置于150℃电热板上蒸发至锥形瓶中液体接近2 mI~3 mL，取下冷却至室温。将样品转移至25mI容量瓶中，用少量水多次洗涤锥形瓶，洗液合并倒入容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。此溶液为试样液。

2. 空白液制备

除不称取试样外，均按试样消化步骤进行操作。

3.测定

精确吸取15.00mL试样液、空白液分别置于250mL烧杯中，加10mL硝酸溶液，用水稀释至100mI，盖上表面皿，于电炉上加热至沸。取下烧杯，在不断搅拌下，加人50mL喹钼柠酮沉淀剂，继续加热至微沸，并保持微沸2min，取下烧杯，轻轻搅拌片刻使沉淀迅速沉降。静置冷却后，用预先烘干至恒重的G4坩埚抽滤。先将上层清液滤完，然后以倾泻法洗涤1次~2次，将沉淀全部转移至G4坩埚中，再用水洗涤沉淀5次~6次。将坩埚底部的水用滤纸吸干后，于180℃ ±20℃ 干燥箱中干燥1h，取出，放人干燥器中冷却0.5h后称量。再将G4坩埚放入180℃ ±20℃干燥箱中干燥0.5h，取出，放人干燥器中冷却0.5h后称量。至前后两次质量差不超过2mg，即为恒量。

4. 平行试验

按以上步骤，对同一试样进行平行试验测定。

分光光度法原理样品经干法灰化或湿法消化后制成稀酸溶液，磷酸根与偏钒酸铵、钼酸铵的混合试剂反应生成黄色化合物，于430nm处测量吸光度，以标准曲线法计算磷含量。

试剂若无特别说明，所用试剂均为分析纯，所用水应符合GB/T 6682的要求。2

硝酸；硝酸:硝酸+水=1+2；偏钒酸铵(2.5g/L)；钼酸铵(50g/L)；显色剂；100ug/mL磷标准溶液。

仪器和设备实验室常规设各及下列仪器。

注意:所有玻璃器皿需用不含磷的洗涤剂彻底洗净，然后用水冲洗。

分析天平:可准确称重至0.001g；坩埚:瓷坩埚或石英坩埚；机械设备:用于试样的均质。包括:绞肉机、斩拌机等肉类组织粉碎机；马弗炉：可控温550℃ ± 20℃；干燥箱；电热板；分光光度计。

分析步骤1.样液制备

1）试样准备：同上。

2）试样消化：同上。

2. 空白液制备

除不称取试样外,均按试样消化步骤进行操作。

3. 标准工作曲线的绘制

精确吸取磷标准液0.00mL，0.10mL，0.20mL，0.30mL，0.40mL，0.50mI，到25mL容量瓶中。加人8mL显色剂，用水稀释至刻度，混匀。此时容量瓶中溶液磷的浓度分别为0.00ug/mL，0.40ug/mL，0.80ug/mL，1.20ug/mL，1,60ug/mL，2.00ug/mL，静置15min后于在430nm处测定其吸光度，以标准工作液中磷的质量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

4. 测定

精确吸取2mL试样液、空白液分别置于25mL的容量瓶中，以下按照步骤与标准工作液同时进行。根据试样液的吸光度，从标准曲线上查出溶液中对应的总磷的质量。

5. 平行试验

按以上步骤对同一试样进行平行试验测定。