原理
试样与稀盐酸共同煮沸,游离出包含的和结合的脂类部分,过滤得到的物质,干燥,然后用正已烷或石油醚抽提留在滤器上的脂肪,除去溶剂,即得脂肪总量。
试剂所用试剂均为分析纯,所用水为蒸馏水或相当纯度的水。
(1)抽提剂:正己烷或30-60℃沸程石油醚;
(2)盐酸(GB622):2mol/L溶液;
(3)蓝石蕊试纸;
(4)沸石。
仪器和设备(1)实验室常规仪器和设备。
(2)绞肉机:孔径不超过4mm。
(3)索氏抽提器
试样(1)按GB9695.19取样;
(2)至少取有代表性的试样200g,于绞肉机中至少绞两次使其均质化并混匀,试样必须封闭贮存于一完全盛满的容器中,防止其腐败和成分变化,并尽可能提早分析试样。
分析步骤(1)酸水解
称取试样3-5g,精确至0.001g,置250mL锥形瓶中,加入2mol/L盐酸溶液50mL,盖上小表面皿,于石棉网上用火加热至沸腾,继续用小火煮沸1h并不时振摇。取下,加入热水150mL,混匀,过滤。锥形瓶和小表面皿用热水洗净,一并过滤。沉淀用热水洗至中性(用蓝石蕊试纸检验)。将沉淀连同滤纸置于大表面皿上,连同锥形瓶和小表面皿一起于103±2℃干燥箱内干燥1h,冷却。
(2)抽提脂肪
将烘干的滤纸放入衬有脱脂棉的滤纸筒中,用抽提剂润湿的脱脂棉擦净锥形瓶、小表面皿和大表面皿上遗留的脂肪,放入滤纸筒中。将滤纸筒放入索氏抽提器的抽提筒内,连接内装少量沸石并已干燥至恒重的接收瓶,加入抽提剂至瓶内容积的2/3处,于水浴上加热,使抽提剂以每5-6min回流一次抽提4h。
(3)称量
取下接收瓶,回收抽提剂,待瓶中抽提剂剩1-2mL时,在水浴上蒸干,于103±2℃干燥箱内干燥30min,,置干燥器内冷却至室温,称重。重复以上烘干、冷却和称重过程,,直到相继两次称量结果之差不超过试样质量的0.1%。
(4)抽提完全程度验证
用第二个内装沸石、已干燥至恒重的接收瓶,用新的抽提剂继续抽提1h,增量不得超过试样质量的0.1%。同一试样进行两次测定。
分析结果的计算X(%)= (m2-m1)/m×100%
式中:X——试样的总脂肪含量%;
m2——接收瓶、沸石连同脂肪的质量g;
m1——接收瓶和沸石的质量g;
m——试样的质量g。
当分析结果符合允许差的要求时,则取两次测定的算术平均值作为结果,精确至0.1%。
允许差由同一分析者同时或相继进行的两次测定结果之差不得超过0.5%1。