粗蛋白测定方法凯氏定氮法
称取0.5~1.0 g 样品( 总氮含量 5~80mg ) 于消化管中,加入催化剂(6.0 g 硫酸钾,0.4 g 硫酸铜) 和
12mL硫酸,420℃ 消化 120 min, 至消化液澄清,冷却上机; 定氮仪向消化管内加入40mL 氢氧化钠溶液
( 40%) 后蒸馏 5 min,用盐酸标准溶液( 0.1mol/L)滴定硼酸吸收液( 2%) ,溶液由蓝绿色变成灰红色为滴定终点,由盐酸标准溶液消耗量计算样品粗蛋白含量。
杜马斯燃烧法测定步骤: 测定步骤:称取100mg样品(总氮含量为3 ~8mg) 于锡箔纸中压实,置于自动落样器上,待上机检测。同上,称取EDTA 标准品15.0、20.0、30. 0、4 0.0、50. 0、60.0、70. 0、80.0、100.0 和120.0mg,待上机检测,得标准曲线。样品燃烧反应条件: 温度为1 200℃,氧气因子为1.8mL /mg,氧气流速为400mL /min,氦气、氧气、氮气压力分别为2.0、2.5和3.0Pa,高温下充分燃烧分解,生成的气体被净化、除杂,以氦气为载气传送,氮氧化物被还原后,混合气体被吸附,分离,依次通过检测器( TCD) 检测,标准曲线计算定量。样品粗蛋白含量计算公式: 粗蛋白含量= 总氮含量/样品质量× 换算系数( 大豆为5.71; 芝麻为5.30; 花生为5.46; 其他计为6. 25)1 。
粗蛋白质水平变化对动物机体指标的影响粗蛋白水平对动物血液指标的研究动物血液的生理生化指标是反映动物生理机能及代谢状况的重要指标,也是衡量动物健康标准的指标。通过实验发现,与对照组相比,不管是早上还是晚上提供高粗蛋白质含量组血清GLU含量均有升高的趋势,血液中的糖原是供应机体各组织器官的最重要的能量来源,这说明动态营养提高了机体血液主要能量营养水平的维持2。
粗蛋白利用率影响因素研究表明,饥饿和采食的不同生理状态下的蛋白质和能量需求和利用不同。在一天内碳水化合物与脂肪的摄入时间不同显著影响葡萄糖耐量和胰岛素等指标,进而对体重产生影响。早餐的膳食质量指数与年轻女性的身体质量指数等相关。因此,营养对机体代谢和生物钟的影响需要研究其动态规律。但是,由于现有的标准中多是强调合理营养水平比例,缺乏动物机体根据生理活动的变化,自身营养需要量的实时动态变化的结果,以及饲料原料氮( 氨基酸) 和碳水化合物效价及其需要量的实时动态的精确评定。有实验发现,早上饲喂高粗蛋白质水平饲粮和晚上饲喂低粗蛋白质水平饲俩,相比于早上饲喂高粗蛋白质水平饲粮和晚上饲喂低粗蛋白质水平饲粮提高了动物的饲料利用率。
在一天内采食总量和总体营养水平相同的情况下,动态地饲喂不同粗蛋白质水平的方式可以有效提高动物体的生长速度及饲料报酬,影响了部分生理生化指标的水平以及血液氨基酸含量; 早上饲喂高粗蛋白质水平饲粮!晚上饲喂低粗蛋白质水平饲粮显著提高动物的生长性能,这可能是因为提高了蛋白质和能量的利用,但其作用机制和长期的动态营养对动物生长性能的影响仍需要进一步研究2。