[科普中国]-尿内源氮

定义

内源尿氮（endogenous urinay nitrogen）动物基础代谢(或饲喂无氮日粮)时由尿液排出的氮，是体内蛋白质代谢处于最低限度时的尿氮，主要是尿素、尿酸和由肌酸分解而来的肌酐等中的氮。这部分氮和其所含能量不属于未被利用的饲料养分，在测定饲料的真代谢能和蛋白质利用率时应扣除。为机体不摄入蛋白质时尿中所含的氮，它主要来自组织蛋白的分解。

定量表示第一，以绝食代谢为基础表示的内源尿氮排泄量。对鼠、猪等反复实验证明，平均每日每千焦耳绝食代谢的能量，排泄内源尿氮约0.5mg，或每日每千克代谢体重（W0.75）排泄内源尿氮150mg。

第二，用回归模型表示。研究发现，EUN排泄量与动物维持能量需要具有类似规律，特别是生长动物，仅用简单的定量表示方法难于普遍适用。用回归表示可更接近EUN的实际排泄量，例如肉牛的EUN排泄量，用下式估计:
EUN(g/日)=5.9206·logW0.76 W——体重（kg）

蛋白质的生物学价值（biological value，BV）是以氮的摄入与排出的比较为基础，反映蛋白质经体内消化吸收后，被机体利用的程度，蛋白质生物价的值越大，则该蛋白质利用率越高。

氮储留量=氮吸收量-（尿氮-尿内源氮）；氮吸收量=摄入氮-（粪氮-粪代谢氮）；即：

蛋白质生物价=氮储留量/氮吸收量*100%1

测定1 试剂与仪器

1.1 试剂 10%CuSO4;浓H2SO4;2%EDTA;1%NaOH:碱性碘化汞钾;硫酸铵标准溶液

(0.1mg/ml)

1.2 仪器 UV- 754型分光光度计

2 原理

样品经浓H2SO4消化后，尿中的氮转化为硫酸铵存在于消化液中。在碱性条件下，NH+4能与碱性碘化汞钾生成黄色化合物，颜色深浅与尿氮含量成正比，可与标准比较定量

3 操作方法

3.1 样品处理

准确吸取5ml尿样于100ml凯氏烧瓶中，加入2ml 10%CuSO4，10ml浓H2SO4，加热消化至淡蓝色透明，再加热1h，冷却，以无氨水定容至1000ml。

3.2 样品测定

吸取消化液1ml于25ml比色管中，加少量水，加入1ml 1%NaOH，1ml 2%EDTA，5ml碱性碘化汞钾，用无氨水定容至25ml，混匀，以空白调零，于波长430nm处比色。

3.3 标准曲线制作

准确吸取0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8ml硫酸铵标准溶液于25ml比色管中，加少量水和1%CuSO4溶液1ml，加入1ml 1%NaOH溶液，以下操作同样品测定。

4 结果分析

4.1 最大吸收峰

取0.5ml硫酸铵标准溶液按上述操作于波长400～ 700nm扫描，得最大吸收峰为430nm

4.2 加入NaOH对测定结果的影响

吸取0.5ml硫酸铵标准溶液8份，分成2组，每组4份。第一组按下述操作，各加少量水，加1:1硫酸0.5ml，加碱性碘化汞钾5ml，测吸光值。第二组各加少量水，加1ml1%NaOH，加碱性碘化汞钾5ml，测吸光值。

4.3 EDTA用量

吸取样品处理液1ml，按上述操作加入0～ 2.0ml 2%EDTA溶液。结果加入1ml EDTA溶液获得最大吸收峰。

4.4 线性范围

取硫酸铵标准溶液按上述操作。结果在13～ 81ug范围内线性相关(r= 0.9986)。

4.5 回收率

取8份样品，按上述操作得回收率为95.63%- 98.25%。

4.6 对比

用本法和凯氏定氮法对某一尿样同时进行平行测定，结果本法变异系数为4.77%，而凯氏定氮法为5.06%。经t检验，t值为0.49