[科普中国]-食品添加剂：三氯蔗糖

化学性质简介

化学名称：1,6-二氯-1,6-二脱氧-β-D-呋喃果糖-4-氯-4-脱氧-α-D-呋喃半乳糖苷。

分子式：C12H19Cl3O8。

相对分子质量：397.63（按2007 年国际相对原子质量）。

技术要求1 感官要求应符合下表的规定。

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2.理化指标应符合下表的规定。

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鉴别试验1 在检测三氯蔗糖含量试验中，试样液在液相色谱图中的主峰保留时间应与标准溶液中三氯蔗

糖的保留时间相同。

2 在检测相关物质试验中，试样液在薄层色谱图中主色斑的Rf值应与标准溶液主色斑的Rf值相

同。

三氯蔗糖的测定1 试剂和材料a) 乙腈：色谱纯。

b) 三氯蔗糖标准品：质量分数≥98.0%。

2 仪器和设备高效液相色谱仪：配备示差折光检测器，或其他等效的检测器。

3 参考色谱条件a) 色谱柱：C18 反相色谱柱，8mm×10cm，粒度5μm；或其他等效的色谱柱。

b) 流动相：将150mL 乙腈与850mL 水混合均匀后，用0.45μm 滤膜过滤，超声脱气后备用。

c) 柱温：室温。

d) 流动相流速: 1.5 mL/min。

e) 进样量：20 μL。

f) 三氯蔗糖保留时间：9min 左右，为确保获得所需的保留时间，必要时可以调整流动相的比例。

注：系统适用性为重复注入标准溶液两次，所得响应面积的相对误差小于2.0%。

4 分析步骤4.1 标准溶液的制备

称取约0.025g 三氯蔗糖标准品（精确至0.0001g），用流动相溶解，移入25mL 容量瓶中，加流

动相定容至刻度，所得溶液用0.45μm 滤膜过滤，滤液备用。

4.2 试样液的制备

称取约0.025g 试样（精确至0.0001g），用流动相溶解，移入25mL 容量瓶中，加流动相定容至

刻度，所得溶液用0.45μm 滤膜过滤，滤液备用。

5 测定在A.3.3 参考色谱条件下，分别对标准溶液和试样液进行测定，进样量为20 μL，重复进样一次，

计算出其主峰面积平均值。

6 结果计算三氯蔗糖的含量X1按(1)公式计算：

式中：

X1——试样中三氯蔗糖的含量，%；

AU——试样液色谱主峰面积的平均值；

MS——称取的三氯蔗糖标准品质量，单位为克（g）；

P——三氯蔗糖标准品中标示的三氯蔗糖的含量，%；

AS——标准溶液色谱主峰面积的平均值；

MU——称取的试样质量，单位为克（g）；

X0——实测试样的水分含量，%。

实验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对

差值不大于算术平均值的2 %。

比旋光度的测定1 称取约1 g试样（精确至0.00 1g），用水溶解，转移至100 mL容量瓶中，加水定容至刻度，摇

匀。测定温度为20℃±0.5℃。

比旋光度αm(20。C，D)数值以(°)·dm2·kg-1 表示，按公式(2)计算：

αm(20C，D)= …………………………（2）

式中：

α —— 测得的旋光角,单位为度(°)；

l —— 旋光管的长度,单位为分米(dm)；

ρα —— 溶液中有效组分的质量浓度,单位为克每毫升(g/mL)。

2 其他按GB/T 613-2007的规定进行。

水解产物的测定1 试剂和材料a) p-茴香胺。

b) 邻苯二甲酸。

c) 甲醇。

d) 甘露糖醇。

e) 果糖。

2 仪器和设备薄层层析板：涂有0.25mm 厚度的Merk 硅胶60 或其他等效物质。

3 分析步骤1 显色剂的制备

将1.23g p-茴香胺和1.66 g 邻苯二甲酸溶于100 mL 甲醇中。将溶液存放在暗处并冷藏，如果溶

液退色则已失效。

.2 标准溶液A的制备

称取10g 甘露糖醇（精确至0.001g），用水溶解后，移入100mL 容量瓶中，用水定容至刻度。

3 标准溶液B的制备

分别称取10g 甘露糖醇（精确至0.001g）和0.04g 果糖（精确至0.0001g），移入100mL 容量瓶

中，用水定容至刻度。

4 试样液的制备

称取2.5g 试样（精确至0.001g），用5mL 甲醇溶解后，转移至10mL 容量瓶中，用甲醇定容至

刻度。

4 测定取标准溶液A、标准溶液B 和试样液各5μL，分别在同一块薄层层析板的不同位置进行点样，

将每份溶液分5 次(每次1μL) 点于板上，每次点样之间要待样点干燥后再继续点，3 份样点的面积

要基本相同，点样完毕后用显色剂喷雾后于100℃±2℃烘箱中加热15min，加热后立即在阴暗背景

下观察层析板，试样液的色斑呈色不应深于标准溶液B 的色斑呈色。

注意：如果标准溶液A 的点样点变黑，说明层析板加热时间过长，需重新制备。

相关物质的测定1 试剂和材料a) 三氯蔗糖标准品：质量分数≥98.0%。

b) 乙腈。

c) 硫酸。

d) 甲醇。

e) 氯化钠溶液：50g/L。

2 仪器和设备薄层层析板：涂有0.2mm 厚度的C18 烷基修饰的硅胶或其他等效物质。

3 分析步骤1 展开剂的制备

展开剂：氯化钠溶液∶乙腈=70∶30（体积比）。

2 显色剂的制备

配制15%硫酸的甲醇溶液（体积分数）。

3 标准溶液的制备

称取0.5g 三氯蔗糖标准品（精确至0.001g），溶解于5.0mL 甲醇中，此为溶液C。吸取0.5mL

的溶液C，用甲醇定容至100mL，此为溶液D。

4 试样液的制备

称取1.0g 试样（精确至0.001g），溶解于10.0mL 甲醇中。

4 测定取溶液C、溶液D 和试样液各5μL，点于薄层层析板底部，将层析板置于盛有展开剂的层析缸

中，待展开的溶剂前沿移至15cm 时后取出薄层层析板，放置，待展开剂挥发干净后用显色剂喷雾，

然后于 125℃±2℃烘箱中加热 10min。试样液主色斑的 Rf值应与溶液 C 主色斑的 Rf值相同，且试样

液中其他色斑的呈色应不深于溶液D 主色斑的呈色。

Rf 值——试样展开后斑点到原点的距离与溶剂前沿到原点的距离的比值。

甲醇的测定1 试剂和材料a) 甲醇标准品：色谱纯。

b) 正丙醇：色谱纯。

c) 吡啶：色谱纯。

2 仪器和设备气相色谱仪：配有氢火焰离子化检测器。

3 参考色谱条件a) 色谱柱：2.1m×4mm（内径）玻璃柱，内填充0.2mm~0.15mm 聚苯乙烯型色谱固定相；或其

他等效色谱柱。

b) 载气：氮气或氦气。

c) 柱温：150℃。

d) 进样口温度：200℃。

e) 检测器温度：250℃。

f) 流速：20mL/min。

g) 进样量：1μL。

注：系统适用性为重复注入标准溶液两次，所得响应面积的相对误差小于2.0%。

4 分析步骤1 内标溶液的制备

准确吸取1.0mL 正丙醇，置于100mL 容量瓶中，用吡啶定容至刻度，摇匀。移取5mL 该溶液，

置于500mL 容量瓶中，用吡啶定容至刻度，摇匀。

2 标准溶液的制备

准确吸取2.0mL 甲醇，置于100mL 容量瓶中，用内标溶液定容至刻度，摇匀。移取1.0mL 该溶

液，置于100mL 容量瓶中，用内标溶液定容至刻度，摇匀。

3 试样液的制备

称取约2g 试样（精确至0.001g），用内标溶液溶解，移入10mL 容量瓶中，用内标溶液定容至刻度，摇匀。

5 测定在A.7.3 参考色谱条件下，分别对标准溶液和试样液进行测定，进样量为1 μL，重复进样一

次，计算出每次进样甲醇峰面积与内标物峰面积的比值。

6 结果计算甲醇的含量X2 按公式（3）计算：

式中：

X2——试样中甲醇的含量，%；

RU——两次进样试样液中甲醇与内标物(正丙醇)峰面积之比的平均值；

0.00158——标准溶液中甲醇的浓度×甲醇的密度×试样液的体积（2×10-4×0.79×10）；

RS——两次进样标准溶液中甲醇与内标物(正丙醇)峰面积之比的平均值；

MU——称取的试样质量，单位为克（g）。

实验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对

差值不大于算术平均值的10%。1