克隆鱼于1963年最早出现,中国科学院武汉水生生物研究所的科学家童第周用鲫鱼囊胚期的细胞进行人工培养,原理是成年鱼的体细胞也可以去分化和再程序化, 具有发育成个体的全能性。1
简介世界上第一头克隆鱼是在1963年童第周教授研究出来的,鱼类的克隆研究,过去叫鱼类的细胞核移植。
1979年春,中国科学院武汉水生生物研究所的科学家用鲫鱼囊胚期的细胞进行人工培养,经过385天59代连续传代培养后,用直径10微米左右的玻璃管在显微镜下从培养细胞中吸出细胞核,在此同时,除去鲫鱼卵细胞的核,让卵细胞留出空间作好接纳囊胚细胞核的准备,一切准备就绪后,把玻璃管吸出的核移放到空出位置的鲫鱼卵细胞内,得到了囊胚细胞核的卵细胞在人工培养下大部分夭亡了,在189个这种换核卵细胞中,只有两个孵化出了鱼苗,而最终只有一条幼鱼渡过难关,经过80多天培养后长成8厘米长的鲫鱼。这种鲫鱼并没有经过雌、雄细胞的结合,仅仅是给卵细胞换了个囊胚细胞的核,实际上是由换核卵产生的,因此也是克隆鱼。1
克隆鱼的科学地位动物的细胞分为性细胞和体细胞。性细胞是指具有生殖能力的细胞,如精子和卵子。一个性细胞只携带一半的遗传信息,需要精子和卵子结合才能发育成新生命。体细胞是指分化成组织和器官的“定型”细胞,如皮肤细胞、肝脏和血液等,每个体细胞都含有完整的遗传物质DNA。
动物克隆的基本技术是细胞核移植:将一个胚胎的细胞核移入一个去核的卵细胞中,或者将一个体细胞的细胞核经移入一个去核的卵细胞中,由此获得的成体动物叫克隆动物。克隆又分为胚胎细胞克隆和体细胞克隆。早在20 世纪初,科学家就提出: 一个已经分化的体细胞究竟只是保留了相关的特定性能而丧失了其他的所有基因呢,还是保留了所有基因只是选择性沉默和启动个别基因?德国科学家汉斯·斯皮曼在1938 年指出:只有实验才能回答这个问题。
1997 年2 月23 日,苏格兰罗斯林研究所向全世界介绍了第一只体细胞克隆羊———多利。多利羊是 20 世纪科学史上的一个重大突破, 但它并不是世界上第一只体细胞克隆动物。中国科学院水生生物研究所朱作言院士是细胞与发育生物学家,在谈到多利羊与克隆鱼时他认为:“从体细胞克隆的理论和成功的可能性来讲,鱼类的实验比多利羊早15 年回答了这个问题。”
朱作言说:“回顾克隆的大事记,应该说从1949 年开始, 文章发表在1952 年,出现了同一物种胚胎细胞克隆的青蛙; 到了1963 年, 出现了同一物种蝌蚪幼体肠上皮细胞克隆的爪蟾。第一阶段是美国人的研究,第二阶段是英国人的研究,第三阶段则是咱们中国人的研究:1973 年以后, 鲤鱼和鲫鱼之间、草鱼和鳊鱼之间成功地完成了异种克隆,直到1981~1986 年成年鲫鱼体细胞的克隆,我国这十多年的克隆鱼研究写下了辉煌的一页。1997 年‘多利’羊的出生,克隆研究热点又转回到英国。”1
中国克隆鱼历史鱼类的克隆研究,过去叫鱼类的细胞核移植,它首先是由已故中国实验胚胎学家、中国科学院海洋研究所前所长童第周教授于1950 年提出的。
自1952 年Briggs 和King 在两栖类胚胎上进行细胞核移植以后,这方面的工作发展很快,在其他脊椎动物中,核的移植还没有见到有人尝试过。我国研究者以金鱼和鳑鱼为材料,曾于1961 年开始进行鱼类细胞核移植,经过两年的摸索,证明细胞核的移植也可以在鱼类中进行。
第一篇鱼类研究论文于1963 年发表后,“四清”和“文化大革命”开始了,童第周受到批判,工作无法进行。到1970 年,在“抓革命,促生产”的号召下,他的研究集体带着结合生产的意愿, 重新开始工作。他派严绍颐和杜淼到全国各地调查,最后选择中科院武汉水生所、中国水产科学院长江水产研究所和广西南宁水产研究所,组成协作组, 到1973 年便获得了第一批鲤鲫移核鱼,并发现细胞质对个体的发育有一定影响。研究结果以中英文发表在1973 年出版的《动物学报》上。1977 年,童第周等首先向国内外报道了对脊索动物海鞘的核移植。
19 世纪60 年代中国正处于封闭状态,并无什么国际交流,甚至国外的文献也很难看到,所以,对鱼的克隆研究完全是由中国科学家开拓的研究领域。
童第周1979 年3 月30 日在北京逝世,由他主持撰写的论文《鲤鱼细胞核和鲫鱼细胞质配合而成的核质杂种鱼》,以中英文发表在1980 年第4 期出版的《中国科学》上,论文报道了中国成功获得具有“发育全能性”克隆鱼的消息。这是世界上报道的第一例发育成熟的异种间的胚胎细胞克隆动物。
严绍颐和朱作言等人后来又将鲫鱼的细胞核移植到鲤鱼去核的卵子中,也获得成功,证实不同种的生物间也可成功进行细胞核移植。童第周的学生们继续在草鱼和武昌鱼之间进行细胞核移植,均获成功。朱作言说:“童第周领导的研究大大突破了西方学者用青蛙实验所得到的结果,突破了物种之间的禁区。”
1981 年, 中科院水生生物研究所的一个研究小组将成年三倍体鲫鱼的肾脏细胞核移植到二倍体鲫鱼去核的卵子中,获得了三倍体的克隆鱼,并发育成成体,证明成年鱼的体细胞也可以去分化和再程序化,具有发育成个体的全能性。研究论文发表在1986 年的《水生学报》上。这是世界上第一次报道的体细胞克隆动物。
这在科学发展中是一件很重要的事情,证明了成年细胞也可以去分化和再程序化,但是很可惜,当时没有得到更多的认可,直到1996年英国体细胞克隆羊多利出生时才掀起一场轩然大波。1
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郭亮 - 副教授 - 中国海洋大学