屎肠球菌(Enterococcus Faecium)属肠球菌属,是人及动物肠道中正常菌群的一部分,用屎肠球菌JT1701与人体肠系有害菌(大肠杆菌、产气荚膜梭菌、脆弱拟杆菌)和人体肠系益生菌(婴儿双歧杆菌、嗜酸乳杆菌)分别及共同培养发现,肠球球菌对这些菌均有抑制作用。
生物学特性屎肠球菌为圆形或椭圆形,呈单个、成对或短链状排列的革兰氏阳性球菌,无芽孢、无鞭毛,为需氧或兼性厌氧菌,油镜下观察屎肠球菌菌体多单生,对生和链状较少。屎肠球菌对营养要求较高,在血平板上经37℃培养18h后,可形成灰白色、不透明、表面光滑、直径0.5~1mm大小的圆形菌落,无溶血现象出现,在YPD和MRS培养基中均能迅速生长。屎肠球菌具有很好的抗逆性,可在10~45℃、pH4.5~9.6、6.5%NaCl溶液、40%胆汁盐环境中生长;精氨酸产氨,不分解鼠李糖、松三糖和山梨醇,能分解蔗糖、蜜二糖、乳糖、麦芽糖和棉籽糖;一般对庆大霉素、卡那霉素、多粘菌素和链霉素不敏感,对青霉素、红霉素、万古霉素和阿莫西林较为敏感。1
肠道作用机理屎肠球菌进入动物肠道后,主要通过以下四个途径产生作用:①快速黏附肠道黏膜。通过排阻效应抑制病原菌黏附肠道,形成肠道屏障、保护肠道健康、维持微生态平衡。②代谢过程中产生乳酸、细菌素和过氧化氢等物质。可以降低肠道pH值、抑制动物病原菌繁殖、维持和调整肠道微生态平衡、减少肠道内毒素与尿素酶的含量、减少血液中毒素和氨的含量、促进动物器官成熟、改善动物生理状态。③产生多种营养物质(维生素、氨基酸、促生长因子等)。营养物质可参与新陈代谢、促进动物生长。④诱导机体产生细胞因子、干扰素、白细胞介素等。可增强机体非特异性免疫、提高抗病能力、降低炎症反应、促进肠道健康。1
应用随着抗生素陆续被许多国家禁止使用,屎肠球菌等益生菌作为抗生素的替代品正在迅速发展。屎肠球菌可以起到调节动物肠道菌群结构、改善消化酶活性、改善动物生产性能、提高动物机体免疫力、改善动物血液生化指标的功效。
在养猪业中的应用屎肠球菌等益生菌在养猪业中的应用研究较为普遍,可以起到提高猪的生长速度,改善猪健康水平的作用。黄怡等研究表明,仔猪刚出生3日龄到5日龄灌服10%灭菌脱脂奶(对照组)或含有屎肠球菌活菌的10%脱脂奶重悬液(处理组),屎肠球菌组使仔猪盲肠的乳酸菌比率升高,致病性大肠杆菌的数量和比例分别下降,腹泻率显著下降,说明口服屎肠球菌改善了哺乳期仔猪肠道菌群组成,有效的抑制了哺乳仔猪肠道内病原菌繁殖。2华均超等通过在仔猪饲粮中添加不同水平的屎肠球菌(T013)复合制剂,研究屎肠球菌(T013)复合制剂在断奶仔猪生产中的应用,结果表明,屎肠球菌(T013)能改善断奶仔猪生长性能、调节肠道微生态环境,显著的提高断奶仔猪的日增重、降低腹泻率。3王娜等研究活性乳酸菌饲料添加剂对生长育肥猪生长性能的影响,结果表明,通过在饲料中添加活性乳酸菌,不仅降低了生长育肥猪的死亡率,降低了育肥猪肉的脂肪含量,避免了肉质中药物残留,提高了饲料的转化率,提高了猪肉的蛋白质含量、氨基酸总量及谷氨酸含量,而且猪肉的口感好,营养丰富。4从总体上看,屎肠球菌在养猪业中有着广阔的应用前景,势必可以促进养猪业的健康发展。5
在家禽生产中的应用当前家禽养殖过程中,非常容易受到大肠杆菌、金黄色葡萄糖球菌等致病病原微生物的感染。屎肠球菌等益生菌通过改善动物胃肠道微生物区系的平衡,提高营养物质利用率,提高家禽的免疫力和抵抗力等方式维持家禽的正常生长和生产。秦欢蕾等研究饮水中添加屎肠球菌及酸化剂对肉鸡饮水及采食的影响,研究结果表明,饮水中添加屎肠球菌对肉鸡的饮水量和采食量没有负面影响,并且有提高肉鸡日增重的趋势,可以有效的降低肉鸡腹泻率,提高肉鸡的生产性能6。徐基利等在研究饲粮中添加不同水平的乳酸菌制剂对肉仔鸡的影响,结果表明:饲粮中添加0.2%、1.0%乳酸菌可显著提高肉仔鸡ADG、F/I(P 在反刍动物中的应用
反刍动物与非反刍动物相比有着许多独特的生理功能。反刍动物通过反刍可以把食物嚼碎,增加食物与瘤胃微生物的接触面积,促进微生物对食糜的发酵分解;微生物在反刍动物的消化过程中扮演者十分重要的作用;反刍动物通过微生物的发酵分解,可以促进饲料中粗纤维的消化、将质量差的植物性蛋白质转化为更易于反刍动物消化吸收的微生物蛋白质、利用尿素等非蛋白氮合成蛋白质,此外微生物还能合成相应的维生素提供反刍动物的日常需求。屎肠球菌等益生菌在被反刍动物采食后,可以提高反刍动物对饲料的利用率,提高反刍动物对营养物质的消化吸收能力,改善反刍动物的健康水平。姜艳美等(2008)采用人工瘤胃法研究屎肠球菌对瘤胃发酵的影响,结果表明,屎肠球菌能显著提高瘤胃NH3-N浓度(P 在水产养殖中的应用
屎肠球菌等乳酸菌类益生菌在水产养殖中,可以起到抑制有害微生物、净化水质、改善水产动物生态环境、提高免疫力、促进生长的作用。侯树宇等研究复合微生态制剂在对虾养殖中的应用,研究结果表明,微生态制剂可以显著改善对虾养殖池中的水质,养殖池中CODCr明显下降,去除率高达84.7%;微生态复合菌制剂可显著降低养殖水中的CODCr,使水质处于一种良好的状态。9胡毅等研究表明,在凡纳滨对虾饲料中添加益生菌,能使肠道蛋白酶和淀粉酶活力升高,并且能显著降低了肠道及粪便弧菌数(P 潜在危害性
肠球菌感染是新生儿败血症的第3位病因,近几年新生儿和儿童肠球菌败血症的发病率增加了6倍。据报道肠球菌是内源性和外源性医院感染的第二大病原菌,检出率仅次于大肠杆菌。有资料统计,在引起尿路感染的致病菌中,肠球菌感染居第2位;腹腔、盆腔感染,肠球菌居第3位;败血症,肠球菌居第3位,病死率12.6%~57%。
当抗生素大量使用或宿主免疫力低下时,宿主与肠球菌之间的共生状态失衡,肠球菌离开正常寄居部位进入其他组织器官,它首先在宿主组织局部聚集达到阈值密度,然后在粘附素的作用下粘附于宿主细胞的胞外矩阵蛋白,分泌细胞溶解素、明胶酶等毒力因子侵袭破坏宿主组织细胞,并通过质粒接合转移使致病性在肠球菌种间扩散,并耐受宿主的非特异性免疫应答,引起感染性疾病的发生发展。
同时,肠球菌还极易形成耐药性,其耐药性包括固有耐药、获得性耐药及耐受性3种。由于其细胞壁坚厚,肠球菌对许多抗生素表现为固有耐药。肠球菌的耐药性在20世纪70年代表现为对氨基糖甙类耐药, 如庆大霉素和链霉素,80 年代表现为耐β-内酰胺类及糖肽类,1986年首次发现耐万古霉素肠球菌(VRE)。90 年代以后,由于抗菌药物广泛应用,加之侵入性治疗以及过度使用氟喹诺酮类和口服头孢菌素类药物等因素,导致肠球菌耐药菌所致感染菌株及病例不断增加,已成为人类感染的主要病因。由于这类细菌所引起的耐药菌感染治疗难度大,加之肠球菌对抗生索的耐药现象比较复杂,目前,在临床分离的肠球菌中有许多是多重耐药菌株。
美国医院内监测系统表明由VRE导致的医院感染1989年为0.3% ,1993 年为7.9%,在ICU内则增加至13%,至1997 年,超过15%的医院内肠球菌感染为VRE。VRE耐药谱广、易造成感染和流行并且能将耐万古霉素基因转移给其它革兰氏阳性菌,如金黄色葡萄球菌等。同时肠球菌属在干燥的物体表面可存活数日至数周,无疑可以从被污染的手和衣物表面进行携带传播。肠球菌属具备毒力和流行性,本身又可产生介导炎症反应的能力,以及它的耐药性和播散性(包括耐药因子的播散),都对临床患者有潜在的危害,加重病情的进展。
另外,美国研究人员在《医学微生物学杂志》上发表文章指出,粪肠球菌能产生有害化学物质,破坏DNA,进而引起促发直肠癌的基因活动。他们在实验室中仔细研究了直肠细胞对粪肠球菌的反应。结果发现在发酵状态下,粪肠球菌会生成一种叫“超氧化物”的氧分子,这种氧分子会破坏周围细胞的DNA,但粪肠球菌的影响远不止于此。这种超氧化物会给被称为巨噬细胞的免疫细胞发出强烈信号,改变一些肠道寄生细胞的生长、分裂方式,甚至还会增强致癌基因的活动。研究证实,发酵状态下,与人体重要生理过程相关的42种细胞基因都受到了粪肠球菌的影响。
因此,International Probiotics Association 和世界卫生组织(WHO)均建议:益生菌中不宜使用肠球菌!目前最新的益生菌产品如东海药业生产的阿泰宁、宝乐安、爽舒宝等都不含有肠球菌,预计在不久的将来,我国政府也会出台限制肠球菌用于微生态制剂的规定。
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金永成 - 博士生导师 - 吉林大学