术中快速冰冻，漫长的半小时内都经历了什么？

作者：李海龙 资阳市第一人民医院

审核：郭珊岚 资阳市第一人民医院 副主任医师

“冰冻……”一个洪亮同时夹杂着对讲机无线电杂音的声音传来。真是“未见其人，先闻其声”，随后，标本送检员抵达了标本接受室。冰冻取材医生、技术员严阵以待，对标本信息核对无误后签字，接下来取材—制片—阅片—发放冰冻报告。从接到标本开始计时，一直到发放报告，时间不超过30分钟。

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您可能会好奇，什么是术中冰冻呢？为什么要做术中冰冻？冰冻报告需要经历哪些流程？任何标本都可以做术中冰冻吗？做了冰冻的标本还能不能要？夜间可以做冰冻吗？下面我们就来一一回答这些疑问。

什么是术中快速冰冻？

“术中”指患者手术还未结束；“快速”指每个环节环环相扣，争分夺秒，稳中求快；“冰冻”指在比冰还冷的环境下进行包埋、切片、贴片。

制片完成后，诊断医生阅片，给出诊断，发放报告。

这就是术中快速冰冻，一种在手术过程中对病变性质做出快速诊断的技术，一般在30分钟内出具诊断结果。

为什么要做术中冰冻？

有了这项技术，对于手术前无法确定手术范围的患者，可以先行手术，在手术室取出样本，送到病理科，医生在手术室等待30分钟得到结果后，当场决定手术范围。如果在手术中需要确定病变部位是否已经切干净，也可以在手术间等待30分钟，若没有“切干净”，还可以继续手术，扩大切除范围……

以上就是术中冰冻的意义。具体来看一下其适用范围。

•需要通过确定病变性质（如肿瘤或非肿瘤、良性肿瘤或恶性肿瘤等）来决定手术方案的标本。

•了解恶性肿瘤的扩散情况，包括肿瘤是否浸润相邻组织，有无区域淋巴结转移等。

•确定肿瘤部位的手术切缘有无肿瘤组织残留。

•确认切除的组织，如甲状旁腺、输卵管、输精管及异位（如子宫内膜异位、甲状腺异位）组织等。

这30分钟对手术医生来说太重要了，可以让自己心里更有底，知道下一步该做什么。

冰冻报告需要经历哪些流程？

手术前，临床医生与患者签署《术中快速冰冻知情同意书》，告知其意义和局限性。临床医生向病理科提交《术中冰冻申请单》，填写患者的病史及重要的检查结果等信息。

手术时，医生取出标本后立即装入标本袋中，连同经过核对签字后的《病理组织检验送检单》，迅速送到病理科。

那么接下来“最漫长”的30分钟，都经历了些什么呢？

•核对信息：手术室切下来的人体组织被送到病理科后，病理医生需要先核对标本信息并进行登记。

•取材：为了保证速度，经验丰富的冰冻取材医生会根据标本情况选取1～2块大小和厚度合适的组织，并用纱布吸干多余水分。

•冰冻包埋：技术员将包埋剂涂到组织托盘表面，放入冰冻切片机冷冻台，迅速冷冻，待包埋剂底部凝固，迅速放上对应的组织块，压上冷冻锤，迅速制冷。冷冻切片所用的包埋剂通常是OCT（最佳切割温度复合物）包埋剂，这是一种聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物，长得与胶水有点像，其特点是好冻、好切、溶于水。具备“好冻”的优点也不是一个包埋剂说了就算的，冰冻切片机速冻台的温度才是关键，一般要求速冻台的温度低于﹣30 ℃，只有温度够低才能冻得快，同时一定要在组织上压上冷冻锤，这也是减少冰晶对组织影响的关键步骤。然后耐心等待2～3分钟。有条件的科室可以用液氮冷冻，效果更佳。

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•切片：速冻完成后，取下冷冻锤，将组织托盘置于样本头并夹紧，在﹣25 ℃环境下进行修片、切片和贴片。贴片就是把切好的薄薄一层组织（约6～8微米）贴到载玻片上。根据组织类型的不同，切片厚度会有所不同。

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•固定：贴好的切片需要立即放入固定液里固定，时间通常不超过1分钟。

•染色：此时玻片上的组织几乎是透明的，要想在显微镜下看清楚，需要染色，这是一种苏木精-伊红染色（即HE染色）。不过冰冻染色大部分由病理技师手工完成。

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•封片：染色后使用中性树胶封片。至此，一张完整的冰冻切片就完成了。从录入标本至染色结束，一般需要10～15分钟。是的，你没看错，这么多繁杂的步骤，却只要十几分钟，这也切合了“快速”的特点，但只是快还不够，还得是优良的切片，以为诊断保驾护航。剩下的15～20分钟则留给诊断医生进行阅片诊断。

•阅片：技术员将制作完成的切片交给诊断医生进行显微镜观察。诊断医生完成术中病理诊断，出具规范的病理报告，通知手术室，送交临床医生。

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做了冰冻的标本还能不能要？

发放报告后，可以用中性缓冲液福尔马林固定冰冻组织块及标本，要注明固定的时间。对标本进行充分固定后可以常规取材。

任何标本都可以做术中冰冻吗？

当然不是。术中快速活检也有如下不适用的范围。

•疑为恶性淋巴瘤。

•过小的标本（检材＜0.2厘米）。

•术前易进行常规活检者。

•脂肪组织、骨组织和钙化组织。

•需要依据核分裂计数判断良/恶性的软组织肿瘤。

•已知具有传染性的标本，如结核、病毒性肝炎、艾滋病等疾病患者的标本。

术中病理诊断因其紧迫性、重要性，往往需要经验丰富的高年资病理医生来完成，而成长为能独当一面的病理医生需要付出巨大的时间和精力。毕竟这样的“三高”（技术含量高、难度系数高、医疗风险高）人员也难免会遇到发送冰冻报告后紧张得3天都睡不好觉的情况，直到常规结果出来后与冰冻诊断一致才会放心。由此来看，30分钟做出诊断还远远没有结束。

夜间可以做冰冻吗？

外界传言：病理科好安逸嘛，不上周末，不用值班，跟上行政班一样！

其实不然。病理医生不仅要值冰冻班、周末班，而且还会遇到半夜急诊手术需要快速冰冻。他们常常自嘲：“没有在深夜等过冰冻的病理人员是不完整的。”

总之，术中快速冰冻需要手术医生、标本送检员、病理医生、病理技术员相互之间默契协作，整个流程还要环环相扣，只有这样才能更好地为广大患者服务。